Luận án Nghiên cứu Gen Enzyme Thủy Phân Cellulose Ruột Mối bằng Metagenomics
Khám phá enzyme thủy phân cellulose từ ruột mối nhờ metagenomics, tối ưu quá trình phân giải sinh khối, ứng dụng trong sản xuất nhiên liệu sinh học.
Năm xuất bản
Số trang
201
Thời gian đọc
31 phút
Lượt xem
1
Lượt tải
0
Phí lưu trữ
50 Point
Tổng quan nhanh
- Chủ đề:
- Metagenomics ruột mối: Khai thác gen cellulase mới
- Số trang:
- 201 trang
- Trường:
- Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội
- Chuyên ngành:
- Di truyền học
- Tác giả:
- Nguyễn Thị Thảo
- Năm:
- 2015
Tóm tắt nội dung luận án
I.Metagenomics ruột mối Khai thác gen cellulase mới
Nghiên cứu này tập trung vào việc tìm kiếm các gen mã hóa enzyme thủy phân cellulose từ hệ vi khuẩn trong ruột mối. Kỹ thuật metagenomics hiện đại được áp dụng cho mục đích này. Phương pháp này cho phép khám phá gen mới mà không cần nuôi cấy từng loài vi sinh vật riêng lẻ. Ruột mối được chọn làm đối tượng nghiên cứu. Hệ vi sinh vật ruột mối nổi tiếng với khả năng phân hủy cellulose cực kỳ hiệu quả. Mục tiêu chính là phát hiện các gen cellulase mới, sở hữu những đặc tính độc đáo và có tiềm năng ứng dụng cao trong các ngành công nghiệp. Metagenomics cung cấp cái nhìn toàn diện về hệ gen vi sinh vật. Kỹ thuật này giúp hiểu rõ hơn về cơ chế phân giải sinh khối và đẩy nhanh quá trình khai thác tài nguyên gen quý giá từ môi trường phức tạp này.
1.1. Khám phá gen enzyme thủy phân từ hệ metagenome
Quá trình nghiên cứu bao gồm việc phân tích trực tiếp tổng DNA từ mẫu ruột mối. Cách tiếp cận này giúp tiếp cận toàn bộ hệ gen của cộng đồng vi sinh vật. Các gen enzyme thủy phân cellulose sau đó được xác định dựa trên các trình tự thu được. Phương pháp này vượt qua những hạn chế của các kỹ thuật truyền thống. Nó loại bỏ nhu cầu phân lập và nuôi cấy vi khuẩn khó tính. Từ đó, nó mở rộng đáng kể khả năng tìm kiếm các gen cellulase độc đáo và chưa từng được biết đến, tiềm năng ứng dụng cao trong nhiều lĩnh vực công nghiệp.
1.2. Kỹ thuật Metagenomics Công cụ mạnh cho nghiên cứu vi sinh
Metagenomics là một kỹ thuật sinh học phân tử tiên tiến. Nó cho phép nghiên cứu sự đa dạng di truyền và chức năng của vi sinh vật. Kỹ thuật này bao gồm giải trình tự toàn bộ DNA từ một mẫu môi trường tự nhiên. Sau đó, dữ liệu gen được phân tích sâu bằng các công cụ tin sinh học. Việc áp dụng metagenomics đã chứng minh hiệu quả cao trong việc phát hiện gen mới. Đặc biệt, nó hữu ích trong việc tìm kiếm gen liên quan đến phân giải sinh khối và sản xuất năng lượng sinh học. Đây là một phương pháp mạnh mẽ để khai thác tài nguyên di truyền từ các hệ sinh thái phức tạp.
II.Enzyme phân giải cellulose Vai trò trong phân hủy sinh khối
Enzyme phân giải cellulose, hay cellulase, là các enzyme chủ chốt trong quá trình thủy phân cellulose. Cellulose là một polymer carbohydrate phong phú nhất trên Trái Đất. Quá trình thủy phân này tạo ra đường đơn. Đường đơn là nguyên liệu cơ bản có thể chuyển hóa thành nhiên liệu sinh học và các sản phẩm giá trị khác. Cellulase có nhiều ứng dụng quan trọng trong công nghiệp. Chúng được sử dụng rộng rãi trong sản xuất ethanol sinh học, chế biến thực phẩm, ngành dệt may và công nghiệp bột giấy. Hiệu quả của quá trình phân hủy sinh khối phụ thuộc đáng kể vào hoạt tính và đặc tính của các enzyme này. Vì vậy, việc tìm kiếm và phát triển các cellulase hoạt tính cao là mục tiêu then chốt. Nó giúp tối ưu hóa các quy trình công nghiệp và thúc đẩy nền kinh tế tuần hoàn.
2.1. Cơ chế hoạt động của enzyme cellulase
Cellulase không phải là một enzyme đơn lẻ, mà là một phức hợp đa dạng. Chúng hoạt động phối hợp để phân giải cellulose thành các đơn vị nhỏ hơn. Các loại cellulase chính bao gồm endoglucanase, exoglucanase và β-glucosidase. Endoglucanase tấn công ngẫu nhiên các liên kết glycosidic bên trong chuỗi cellulose. Exoglucanase cắt các đoạn disaccharide hoặc monosaccharide từ hai đầu sợi cellulose. Cuối cùng, β-glucosidase thủy phân disaccharide thành glucose. Sự phối hợp nhịp nhàng này tăng cường đáng kể hiệu quả của quá trình phân giải sinh khối.
2.2. Tầm quan trọng của cellulase trong công nghiệp
Cellulase giữ vai trò trung tâm trong nhiều lĩnh vực công nghiệp. Trong ngành năng lượng sinh học, chúng là yếu tố quyết định để chuyển hóa sinh khối lignocellulose thành đường. Đường này sau đó được lên men để sản xuất ethanol. Trong ngành dệt may, cellulase được dùng để làm mềm vải và tạo hiệu ứng giặt bạc denim. Chúng cũng được ứng dụng trong chế biến thực phẩm để cải thiện hương vị và kết cấu sản phẩm. Ngành giấy sử dụng cellulase để xử lý bột giấy và nâng cao chất lượng sản phẩm. Việc tối ưu hóa và phát triển các enzyme cellulase mới mang lại lợi ích kinh tế to lớn.
III.Hệ vi sinh vật ruột mối Nguồn gen cellulase tiềm năng
Ruột mối là một hệ sinh thái vi mô độc đáo, giàu tiềm năng nghiên cứu. Nơi đây chứa một hệ vi sinh vật phong phú và đa dạng. Các vi khuẩn cộng sinh mối đóng vai trò cốt yếu trong quá trình tiêu hóa cellulose từ gỗ. Mối tự thân không sản xuất đủ enzyme cellulase. Chúng phụ thuộc hoàn toàn vào cộng đồng vi khuẩn và vi khuẩn cổ trong ruột của mình. Cộng đồng vi sinh vật này tạo ra một lượng lớn enzyme phân giải cellulose mạnh mẽ. Nghiên cứu sâu hơn về hệ vi sinh vật ruột mối mở ra cơ hội lớn. Nó giúp phát hiện các gen cellulase với hoạt tính cao, bền vững và có khả năng chịu đựng các điều kiện khắc nghiệt. Đây là một nguồn tài nguyên di truyền vô giá cho ngành công nghệ sinh học và năng lượng sinh học.
3.1. Sự đa dạng vi khuẩn cộng sinh mối
Ruột mối là môi trường sống của hàng trăm loài vi khuẩn khác nhau. Mỗi loài vi khuẩn cộng sinh mối có thể đóng góp một phần vào quá trình phân hủy cellulose. Các loài này thuộc nhiều chi và họ khác nhau. Chúng tạo thành một mạng lưới cộng sinh phức tạp và chuyên biệt. Một số loài đặc biệt nổi bật trong việc sản xuất enzyme cellulase. Sự đa dạng sinh học này là kết quả của hàng triệu năm tiến hóa. Nó tối ưu hóa khả năng tiêu hóa thức ăn giàu cellulose của mối, một cách hiệu quả và bền vững.
3.2. Môi trường ruột mối tối ưu cho phân giải cellulose
Môi trường bên trong ruột mối sở hữu những điều kiện đặc biệt. Nó có độ pH ổn định và nhiệt độ phù hợp, thường là môi trường yếm khí hoặc thiếu oxy. Các yếu tố này tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển của nhiều loại vi khuẩn kỵ khí. Những vi khuẩn này nổi tiếng là nhà sản xuất cellulase hiệu quả. Môi trường độc đáo này không chỉ thúc đẩy hoạt động của enzyme mà còn bảo vệ chúng khỏi sự suy thoái. Đây là yếu tố quan trọng giúp mối và vi khuẩn cộng sinh tồn tại và phát triển.
IV.Giải trình tự metagenome Phát hiện gen enzyme thủy phân
Quá trình giải trình tự metagenome là bước trọng tâm của nghiên cứu này. Đầu tiên, tổng số DNA được tách chiết cẩn thận từ mẫu ruột mối. Sau đó, DNA này được giải trình tự bằng các công nghệ tiên tiến nhất hiện nay. Các máy giải trình tự thế hệ mới tạo ra một lượng dữ liệu khổng lồ. Dữ liệu thô này sau đó trải qua quá trình xử lý và phân tích bằng các công cụ tin sinh học chuyên biệt. Mục tiêu chính là xác định và dự đoán các trình tự gen cụ thể. Các trình tự này được cho là mã hóa enzyme phân giải cellulose. Các gen tiềm năng sau đó được kiểm tra kỹ lưỡng về chức năng và đặc tính. Quy trình này cung cấp thông tin chi tiết về cấu trúc và hoạt động của enzyme.
4.1. Quy trình giải trình tự DNA đa hệ gen
DNA đa hệ gen được thu nhận và tinh sạch từ mẫu ruột mối. Sau đó, thư viện DNA được xây dựng từ mẫu này. Thư viện được nạp vào máy giải trình tự thế hệ mới, ví dụ như Illumina HiSeq2000. Quá trình giải trình tự tạo ra hàng triệu đoạn trình tự DNA ngắn, gọi là "reads". Các read này đại diện cho toàn bộ hệ gen của cộng đồng vi sinh vật có trong mẫu. Độ bao phủ trình tự cao đảm bảo khả năng phát hiện nhiều gen quan trọng.
4.2. Phân tích tin sinh học để tìm gen cellulase
Các đoạn "reads" DNA thu được sau đó được lắp ráp thành các đoạn dài hơn, gọi là "contigs". Tiếp theo, các đoạn contig này được dự đoán gen bằng các phần mềm chuyên dụng. Các gen tiềm năng được so sánh với các cơ sở dữ liệu gen đã biết. Mục đích là tìm kiếm các trình tự tương đồng với gen cellulase. Tin sinh học enzyme đóng vai trò quan trọng trong việc xác định các domain chức năng. Nó cũng giúp đánh giá tiềm năng hoạt tính của enzyme. Các công cụ này giúp đẩy nhanh quá trình xác định và đặc trưng hóa gen mới.
V.Ứng dụng gen cellulase Hướng tới năng lượng sinh học
Các gen cellulase được phát hiện từ hệ vi sinh vật ruột mối mang tiềm năng ứng dụng rất lớn. Đặc biệt, chúng có thể đóng góp đáng kể vào lĩnh vực sản xuất năng lượng sinh học. Enzyme cellulase có khả năng chuyển hóa sinh khối lignocellulose. Sinh khối là nguồn tài nguyên dồi dào, tái tạo và bền vững. Việc chuyển hóa cellulose thành glucose là bước thiết yếu. Glucose sau đó được lên men để sản xuất ethanol, một loại nhiên liệu sinh học sạch. Phát triển các cellulase hiệu quả cao là chìa khóa để giảm chi phí sản xuất biofuel. Công nghệ này hứa hẹn một tương lai năng lượng sạch hơn. Nó giảm sự phụ thuộc vào nhiên liệu hóa thạch và giảm thiểu tác động môi trường.
5.1. Tiềm năng cellulase cho sản xuất cồn sinh học
Sản xuất cồn sinh học (ethanol biofuel) từ sinh khối là một hướng đi quan trọng. Cellulase với hoạt tính cao đóng vai trò then chốt trong việc tăng năng suất và giảm chi phí. Các cellulase từ vi khuẩn ruột mối thường có khả năng hoạt động tốt. Chúng có thể chịu được các điều kiện khắc nghiệt của quy trình công nghiệp. Điều này làm cho chúng trở thành ứng cử viên lý tưởng để tối ưu hóa quá trình sản xuất ethanol. Chúng góp phần tạo ra một nguồn nhiên liệu bền vững và thân thiện với môi trường.
5.2. Hướng phát triển công nghệ phân hủy sinh khối
Nghiên cứu này góp phần đáng kể vào việc phát triển công nghệ phân hủy sinh khối. Việc tìm kiếm các gen mới là nền tảng cho sự đổi mới. Các gen này có thể mã hóa các enzyme siêu bền và có hoạt tính cao. Những enzyme này hoạt động hiệu quả trong các điều kiện công nghiệp khắc nghiệt. Công nghệ phân hủy sinh khối hiệu quả hơn sẽ có tác động tích cực lớn. Nó sẽ thúc đẩy sản xuất năng lượng sạch từ các nguồn tài nguyên tái tạo. Đồng thời, nó giúp giảm thiểu lượng chất thải nông nghiệp và công nghiệp, hướng tới một nền kinh tế xanh.
Mục lục chi tiết luận án
Tải xuống file đầy đủ để xem toàn bộ nội dung
Tải đầy đủ (201 trang)Trích đoạn nội dung luận án
Tải xuống để đọc toàn bộĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Nguyễn Thị Thảo NGHIÊN CỨU GEN MÃ HÓA ENZYME THAM GIA THỦY PHÂN CELLULOSE TỪ KHU HỆ VI KHUẨN TRONG RUỘT MỐI BẰNG KỸ THUẬT METAGENOMICS LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Hà Nội - Năm 2015 1 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Nguyễn Thị Thảo NGHIÊN CỨU GEN MÃ HÓA ENZYME THAM GIA THỦY PHÂN CELLULOSE TỪ KHU HỆ VI KHUẨN RUỘT MỐI BẰNG KỸ THUẬT METAGENOMICS LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Chuyên ngành: Di truyền học Mã số: 62 42 01 21 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: 1. TS Trương Nam Hải 2. TS Đỗ Thị Huyền Hà Nội - Năm 2015 2 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Đây là công trình nghiên cứu của tôi và một số kết quả cùng cộng tác với các cộng sự khác. Các số liệu và kết quả trình bày trong luận án là trung thực, một phần đã được công bố trên các tạp chí khoa học chuyên ngành với sự đồng ý và cho phép của các đồng tác giả.
Phần còn lại chưa được tác giả nào công bố trong bất kì công trình nào khác. Hà Nội, ngày tháng năm 2015 Tác giả Nguyễn Thị Thảo 3 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới GS.TS Trương Nam Hải và TS Đỗ Thị Huyền phòng Kỹ thuật di truyền, Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã thu nhận, hướng dẫn tận tình, quan tâm hết mực và tạo mọi điều kiện cho tôi hoàn thành luận án này. Luận án được thực hiện tại phòng Kỹ thuật di truyền. Phòng Thí nghiệm trọng điểm Công nghệ Gen, Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam và được hỗ trợ bởi đề tài Nghị định thư với Nhật Bản: “Phân lập hệ gen mã hóa cho enzyme thủy phân lignocellulose từ khu hệ vi sinh ruột mối Việt Nam bằng kỹ thuật Metagenomics”.
Trong thời gian học tập và nghiên cứu tại phòng Kỹ thuật di truyền, tôi đã nhận được sự giúp đỡ và sự chỉ bảo tận tình về chuyên môn của tập thể cán bộ nghiên cứu của phòng. Tôi xin chân thành cảm ơn sự giúp đỡ quý báu đó! Tôi xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc đến các thầy cô giáo trong Khoa Sinh học, Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội đã giảng dạy và chỉ bảo cho tôi những kiến thức chuyên môn và kỹ năng cần thiết. Để hoàn thành luận án, tôi đã nhận được nhiều sự giúp đỡ quý báu và nhiệt tình của các đồng nghiệp công tác tại khoa Sinh học, Trường Đại học Vinh, tôi xin chân thành cảm ơn sự giúp đỡ quý báu đó! Với tất cả lòng biết ơn, tôi xin dành cho gia đình, bố mẹ, chồng và con, những người thân đã thông cảm, động viên, tạo điều kiện và chia sẻ khó khăn cùng tôi trong thời gian qua! Nguyễn Thị Thảo 4 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC MỞ ĐẦU. Tính cấp thiết của đề tài.
Mục tiêu của đề tài. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu. Nội dung nghiên cứu. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài.
Đóng góp mới của đề tài. TỔNG QUAN TÀI LIỆU. GIỚI THIỆU CHUNG VỀ LIGNOCELLULOSE. GIỚI THIỆU CHUNG VỀ CELLULASE.
Cơ chế hoạt động của cellulase và sự thủy phân cellulose. Cấu trúc của cellulase. Cấu trúc chung của cellulase. Cellulosome thủy phân cellulose.
CELLULASE CỦA VI KHUẨN. Sơ lược về họ cellulase. Cellulase của vi khuẩn và vi khuẩn cổ. Cellulase vi khuẩn và vi khuẩn cổ ưa ấm.
Cellulase ở vi khuẩn và vi khuẩn cổ ưa nhiệt. Ứng dụng của cellulase. Ứng dụng của cellulase trong công nghệ sản xuất bia, rượu vang, chế biến thực phẩm và thức ăn. Ứng dụng cellulase trong dệt may.
Ứng dụng cellulase trong chế biến bột giấy và giấy. 33 5 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Ứng dụng của cellulase trong sản xuất cồn sinh học. MỐI VÀ HỆ VI SINH VẬT RUỘT MỐI LIÊN QUAN ĐẾN SỰ THỦY PHÂN LIGNOCELLULOSE.
Sơ lược về mối và đa dạng mối ở Việt Nam. Hệ vi sinh vật trong ruột mối bậc thấp. Sự tiêu hóa lignocellulose của mối. Tình hình nghiên cứu gen mã hóa cellulase của sinh vật trong đường ruột mối bậc thấp.
KHÁI QUÁT CHUNG VỀ METAGENOMICS. Phương pháp tiếp cận tìm gen mới bằng Metagenomics. Phân lập gen từ thư viện DNA đa hệ gen. Khai thác và phân lập gen từ dữ liệu trình tự DNA đa hệ gen.
Phương pháp giải trình tự của một số hệ thống máy thế hệ mới. Tập hợp các read thành contig. Ứng dụng của Metagenomics. Ứng dụng của Metagenomics trong khai thác gen mới và đánh giá sự đa dạng vi sinh vật.
Tiềm năng ứng dụng của Metagenomics. ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU. ĐỐI TƢỢNG, VẬT LIỆU, HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ MÁY MÓC. Đối tượng và vật liệu.
Hóa chất và thiết bị máy móc. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU. Các phương pháp vi sinh. Các phương pháp sinh học phân tử.
Tách chiết DNA hệ gen của mối. Phương pháp thu nhận vi khuẩn ruột mối và tách chiết DNA đa hệ gen của chúng. Tinh sạch DNA đa hệ gen bằng phương pháp máng đơn (troughing). 60 6 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.
Giải trình tự DNA đa hệ gen bằng máy giải trình tự thế hệ mới HiSeq2000 của Illumina. Phương pháp biến nạp DNA plasmid vào vi khuẩn E. coli bằng sốc nhiệt. Phương pháp tách chiết DNA plasmid từ tế bào vi khuẩn E.
Phương pháp cắt và ghép nối gen. Phương pháp tinh sạch DNA từ gel agarose bằng QIAquick Gel Extraction kit. Kỹ thuật PCR. Thiết kế vector biểu hiện pET22b(+) mang gen egc.
Điện di DNA trên gel agarose. Phương pháp biểu hiện gen. Điện di biến tính protein trên gel polyacrylamide-SDS. Điện di protein trên gel polyacrylamide không SDS.
Các phương pháp hóa sinh protein. Phương pháp tinh chế protein bằng sắc kí ái lực his-tag. Định lượng protein bằng phương pháp Bradford. Định lượng đường khử bằng phương pháp DNS.
Phương pháp xác định hoạt tính endoglucanase. Phương pháp xác định hoạt tính β-glucosidase và β-xylosidase. Xác định ảnh hưởng của nhiệt độ, pH, các ion kim loại và một số hóa chất lên hoạt tính endoglucanase. Xác định độ bền của enzyme.
Xác định thông số động học của enzyme. Các phương pháp tin sinh học và xử lý số liệu bằng phần mềm sinh học. Phân tích trình tự DNA đa hệ gen vi khuẩn ruột mối. So sánh trình tự ORF của dữ liệu DNA đa hệ gen với CSDL của NCBI.
Thiết kế mồi bằng phần mềm FastPCR. Kiểm tra vị trí của các enzyme hạn chế trên gen quan tâm bằng phần mềm trực tuyến RestrictionMapper. 75 7 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Chuyển mã trình tự DNA sang trình tự axit amin bằng chương trình dịch mã ExPASy.
Xây dựng cây phát sinh loài của loài mối nghiên cứu với các loài mối khác bằng phần mềm Genedoc và MEGA5. Dự đoán cấu trúc của EGC bằng phần mềm Phyre2. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN. KẾT QUẢ ĐỊNH LOÀI MỐI NGHIÊN CỨU BẰNG PHƢƠNG PHÁP PHÂN TỬ.
Tách chiết DNA hệ gen của mối. PCR khuếch đại đoạn DNA của gen mã hóa RNA ribosome 16S ti thể mối. Phân tích sản phẩm PCR. TÁCH CHIẾT, ĐỌC VÀ PHÂN TÍCH TRÌNH TỰ DNA ĐA HỆ GEN VI KHUẨN RUỘT MỐI C.
Tách chiết và tinh sạch DNA đa hệ gen vi khuẩn ruột mối C. Đọc và phân tích trình tự DNA đa hệ gen vi khuẩn ruột mối C. Tập hợp trình tự và xác định gen. Đa dạng vi sinh vật ruột mối C.
GEN MÃ HÓA ENZYME THUỶ PHÂN CELLULOSE CỦA VI KHUẨN RUỘT MỐI C. Dự đoán chức năng gen của DNA đa hệ gen vi khuẩn ruột mối C. Gen mã hóa enzyme phân hủy cellulose. Lựa chọn ORF cellulase để biểu hiện.
TÁCH DÕNG GEN egc. Trình tự ORF GL0130684. Khuếch đại gen egc. Ghép nối sản phẩm khuếch đại gen egc vào vector tách dòng pJET1.
Biến nạp sản phẩm ghép nối vào tế bào E. Cắt kiểm tra plasmid tái tổ hợp bằng enzyme hạn chế. 108 8 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Phân tích trình tự gen wegc phân lập được từ DNA đa hệ gen vi khuẩn ruột mối C.
Khuếch đại gen egc không chứa tín hiệu tiết từ khuôn pJET-wegc. Thiết kế vector biểu hiện gen egc. Ghép nối gen egc vào vector biểu hiện. Cắt kiểm tra plasmid tái tổ hợp pET22-egc.
BIỂU HIỆN GEN egc TRONG VI KHUẨN E. Chọn dòng biểu hiện gen egc trong tế bào E. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự biểu hiện gen egc trong tế bào E. Ảnh hưởng của nồng độ IPTG đến hiệu quả cảm ứng.
Điện di và kiểm tra hoạt tính endoglucanase của EGC. Tinh chế protein EGC bằng cột sắc kí ái lực His-tag. Tính đặc hiệu cơ chất của EGC. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến hoạt tính endoglucanase của EGC.
Ảnh hưởng của pH đến hoạt tính của EGC. Độ bền nhiệt của EGC. Ảnh hưởng của một số ion kim loại và hóa chất lên hoạt tính của EGC 128 3. Đặc điểm động học của EGC.
132 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .135 TÀI LIỆU THAM KHẢO.138 9 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.
Nội dung được bảo vệ bản quyền — Tải xuống đầy đủ
Trích dẫn luận án này
Nguyễn Thị Thảo (2015). Gen Enzyme Thủy Phân Cellulose Ruột Mối: Metagenomics [Luận án tiến sĩ, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc gia Hà Nội]. LuanAn.net. https://luanan.net/sinh-hoc/cong-nghe-sinh-hoc/nghien-cuu-gen-enzyme-thuy-phan-cellulose-ruot-moi-metagenomics
Câu hỏi thường gặp
Luận án "Gen Enzyme Thủy Phân Cellulose Ruột Mối: Metagenomics" nghiên cứu về vấn đề gì?
Khám phá enzyme thủy phân cellulose từ ruột mối nhờ metagenomics, tối ưu quá trình phân giải sinh khối, ứng dụng trong sản xuất nhiên liệu sinh học.
Luận án "Gen Enzyme Thủy Phân Cellulose Ruột Mối: Metagenomics" được bảo vệ tại trường nào?
Luận án này được bảo vệ tại Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc gia Hà Nội. Năm bảo vệ: 2015.
Luận án "Gen Enzyme Thủy Phân Cellulose Ruột Mối: Metagenomics" thuộc chuyên ngành gì?
Luận án "Gen Enzyme Thủy Phân Cellulose Ruột Mối: Metagenomics" thuộc chuyên ngành Di truyền học. Danh mục: Công Nghệ Sinh Học.
Luận án "Gen Enzyme Thủy Phân Cellulose Ruột Mối: Metagenomics" có bao nhiêu trang?
Luận án "Gen Enzyme Thủy Phân Cellulose Ruột Mối: Metagenomics" có 201 trang. Bạn có thể xem trước một phần tài liệu ngay trên trang web trước khi tải về.
Cách tải luận án "Gen Enzyme Thủy Phân Cellulose Ruột Mối: Metagenomics" về máy như thế nào?
Để tải luận án về máy, bạn nhấn nút "Tải xuống ngay" trên trang này, sau đó hoàn tất thanh toán phí lưu trữ. File sẽ được tải xuống ngay sau khi thanh toán thành công. Hỗ trợ qua Zalo: 0559 297 239.