Luận án tiến sĩ tinh chế nghiên cứu một số tính chất của các lectin từ một số lo
Luận án: Luận án tiến sĩ tinh chế nghiên cứu một số tính chất của các lectin từ một số loài thuộc họ đậu fabaceae họ đậu tằm moraceae và khả năng ứng dụng trong
Luan An
Luận án tiến sĩ
Số trang
138
Thời gian đọc
21 phút
Lượt xem
0
Lượt tải
0
Phí lưu trữ
40 Point
Tổng quan nhanh
- Chủ đề:
- 1. Tổng quan về Lectin và ứng dụng quan trọng
- Số trang:
- 138 trang
- Tác giả:
- Luan An
Tóm tắt nội dung luận án
I. Tổng quan về Lectin và ứng dụng quan trọng
Nghiên cứu khoa học về Lectin đã trải qua quá trình dài. Lectin là protein hoặc glycoprotein không phải kháng thể, có khả năng liên kết đặc hiệu với carbohydrate. Luận văn tiến sĩ này cung cấp cái nhìn tổng thể về lịch sử nghiên cứu Lectin trên thế giới và tại Việt Nam. Sự phân bố đa dạng của Lectin trong giới sinh vật, từ thực vật đến động vật và vi sinh vật, được thảo luận chi tiết. Nắm vững những kiến thức cơ bản này là nền tảng cho các nghiên cứu chuyên sâu hơn về tinh chế và đặc trưng Lectin.
1.1. Lược sử nghiên cứu Lectin và phân bố tự nhiên
Lược sử nghiên cứu Lectin cho thấy sự tiến bộ trong việc hiểu vai trò và cơ chế hoạt động của chúng. Lectin được tìm thấy rộng rãi trong hạt thực vật, mô động vật, và vi sinh vật. Sự phân bố này phản ánh chức năng đa dạng của Lectin trong các quá trình sinh học, từ bảo vệ đến tương tác tế bào.
1.2. Tính chất hóa học sinh học của Lectin
Lectin sở hữu nhiều tính chất hóa học và sinh học đặc trưng. Khối lượng phân tử và cấu tạo phức tạp ảnh hưởng đến chức năng. Tính tan, khả năng kết tủa và thành phần hóa học là các yếu tố quan trọng. Sự tương tác của Lectin với đường là một trong những tính chất đặc trưng nhất.
1.3. Ứng dụng tiềm năng của Lectin trong đời sống
Lectin có tiềm năng ứng dụng lớn. Khả năng kích thích phân bào, ngưng kết tế bào máu, và vai trò trong liên kết vi khuẩn mở ra nhiều hướng nghiên cứu. Lectin được sử dụng trong y học, nông nghiệp và công nghệ sinh học.
II. Phương pháp tinh chế phân lập Lectin hiệu quả
Quá trình tinh chế Lectin đòi hỏi các phương pháp phân lập tiên tiến. Luận văn này mô tả chi tiết các nguyên liệu và quy trình thực hiện. Mục tiêu là đạt được độ tinh khiết cao nhất cho các mẫu Lectin. Các kỹ thuật tinh sạch được áp dụng nhằm tách biệt Lectin khỏi các protein tạp.
2.1. Nguồn nguyên liệu và quy trình chiết tách Lectin
Các loại đậu như đậu cove, đậu guam, đậu rựa, đậu ván, và hạt mít mật là nguồn nguyên liệu chính. Mẫu thí nghiệm được xử lý và bảo quản cẩn thận. Quy trình chiết tách ban đầu bao gồm việc nghiền mẫu và chiết xuất protein hòa tan.
2.2. Các phương pháp sắc ký tinh sạch và kiểm tra độ tinh khiết
Phương pháp sắc ký là cốt lõi trong tinh sạch Lectin. Sắc ký lọc gel Sephadex G-75, G-100 và sắc ký trao đổi ion DEAE-Xenluloza, DEAE-Trysacryl được sử dụng. Sắc ký ái lực giúp phân lập Lectin dựa trên khả năng liên kết đường đặc hiệu. Độ tinh khiết được kiểm tra bằng SDS-PAGE.
2.3. Xác định hàm lượng protein và hoạt độ Lectin
Hàm lượng protein được xác định bằng phương pháp Bradford hoặc Lowry. Hoạt độ Lectin được đánh giá thông qua khả năng ngưng kết hồng cầu. Việc xác định hoạt độ riêng và hoạt độ tổng số là cần thiết để theo dõi quá trình tinh sạch.
III. Đặc trưng sinh hóa Lectin từ các nguồn thực vật
Các Lectin tinh sạch từ nhiều nguồn thực vật khác nhau được đặc trưng về mặt sinh hóa. Nghiên cứu này tập trung vào việc làm rõ các tính chất hóa học và vật lý của chúng. Kết quả cung cấp thông tin quý giá về sự đa dạng của Lectin. Các đặc trưng vật lý và hóa học giúp phân biệt và phân loại các Lectin.
3.1. Nghiên cứu ảnh hưởng của pH nhiệt độ đến hoạt độ Lectin
Ảnh hưởng của pH môi trường và nhiệt độ đến hoạt độ Lectin được khảo sát. Mỗi Lectin có pH và nhiệt độ tối ưu khác nhau. Khả năng duy trì hoạt tính dưới các điều kiện khắc nghiệt là một đặc điểm quan trọng.
3.2. Tương tác đặc hiệu của Lectin với các loại đường
Tương tác đặc hiệu với đường là tính chất nổi bật của Lectin. Khả năng liên kết với monosaccharide hoặc oligosaccharide cụ thể được xác định. Các yếu tố kích thích hoặc ức chế hoạt độ Lectin cũng được nghiên cứu.
3.3. Xác định khối lượng phân tử và thành phần axit amin
Khối lượng phân tử của Lectin được xác định bằng SDS-PAGE và sắc ký lọc gel. Thành phần axit amin được phân tích để hiểu cấu tạo cơ bản của protein. Điều này giúp xác định cấu trúc sơ cấp của Lectin.
IV. Xác định cấu trúc và hoạt tính sinh học Lectin
Nghiên cứu này không chỉ tinh chế Lectin mà còn đi sâu vào xác định cấu trúc và hoạt tính sinh học của chúng. Việc hiểu rõ cấu trúc phân tử giúp lý giải cơ chế hoạt động của Lectin. Các đặc tính sinh học được khảo sát để khám phá tiềm năng ứng dụng.
4.1. Phân tích cấu trúc phân tử và trình tự axit amin
Cấu tạo phân tử của Lectin được so sánh giữa các loại. Trình tự axit amin tận cùng N được phân tích để xác định đặc điểm độc đáo. Phân tích này đóng góp vào việc xác định cấu trúc tổng thể của Lectin.
4.2. Khả năng kích thích phân bào và ngưng kết hồng cầu
Hoạt tính sinh học của Lectin được đánh giá qua khả năng kích thích phân bào. Khả năng ngưng kết hồng cầu là một đặc trưng cơ bản. Các thí nghiệm này cung cấp thông tin về hoạt tính sinh học của Lectin.
4.3. Vai trò của Lectin trong liên kết vi khuẩn và miễn dịch
Lectin đóng vai trò trong liên kết vi khuẩn và bảo vệ cơ thể sinh vật. Một số Lectin có đặc tính giống enzyme hoặc là chất dự trữ. Nghiên cứu sâu hơn về vai trò miễn dịch của Lectin là cần thiết.
V. So sánh Lectin và tiềm năng ứng dụng thực tiễn
Luận văn tiến sĩ này tiến hành so sánh toàn diện các tính chất Lectin từ nhiều nguồn. Từ đó, tiềm năng ứng dụng thực tiễn của Lectin được đánh giá. Các phát hiện mới có thể mở ra hướng nghiên cứu và ứng dụng trong tương lai. Nghiên cứu khoa học về Lectin tiếp tục mang lại nhiều giá trị.
5.1. So sánh tính chất Lectin từ các nguồn thực vật khác nhau
So sánh các tính chất sinh hóa như ảnh hưởng của nhiệt độ, pH và tương tác đường. Sự khác biệt về khối lượng phân tử và cấu tạo cũng được so sánh. Các kết quả này giúp phân loại Lectin dựa trên đặc điểm của chúng.
5.2. Đồng thái tích lũy Lectin trong quá trình phát triển
Nghiên cứu đồng thái Lectin trong quá trình sinh trưởng và phát triển của cây đậu ván đen và hạt mít mật. Sự tích lũy Lectin trong các bộ phận khác nhau được theo dõi. Điều này cung cấp cái nhìn về vai trò sinh lý của Lectin.
5.3. Tiềm năng ứng dụng Lectin đã tinh sạch
Lectin tinh sạch có tiềm năng lớn trong nhiều lĩnh vực. Ứng dụng trong chẩn đoán, điều trị y học, công nghiệp thực phẩm, và nghiên cứu sinh học. Việc hiểu rõ tính chất sẽ thúc đẩy các ứng dụng thực tiễn.
Mục lục chi tiết luận án
Tải xuống file đầy đủ để xem toàn bộ nội dung
Tải đầy đủ (138 trang)Trích đoạn nội dung luận án
Tải xuống để đọc toàn bộCAC C H C VlfiT TAT TRONG LUAN AN BSA (Bovine Serum Albumin) : Albumin huyet thanh bo. Da : Dalton DEAE (Dietilaminoetil) : Nhom chiic trao doi anion. HAA (Hemagglutininating activity) : Hoat d6 ngung ket hong cau. HDTS : Hoat do t6ng so, HDR : Hoat d6 rieng.
Ig (Immuno globuline): globulin mi6n dich. kDa : kilo Dalton k.d : Kh6ng xac dinh LM : Lectin tijr hat mit mit. Mr : Kh6'i luong phan tir. CD (Optical density) : M^it d6 quang hoc.
PAGE : (Polyacrylamide Gel Electrophoresis) Dien di tren gel polyacrilamit. PBS (Phosphate buffered Saline) : Dem phot phat mu6'i. SDS : Sodium dodecyl sulfate. SDS - PAGE : Dien di tren gel polyacrilamit c6 SDS KY HIEU QUOC TE CAC AXIT AMIN A Ala Alanine R Arg Arginine N Asn Asparagine D Asp Axit aspartic C Cys Cysteine Q Gin Glutamine E Glu Axit glutamic G Gly Glycine H His Histidine I He Isoleucine L Leu Leucine K Lys Lysine M Met Methionine F Phe Phenylalanine P Pro Proline S Ser Serine T Thr Threonine W Trp Tryptophane Y Tyr Tyrosine V Val Valine MUC LUC Trang Ma dau 8 Chuang 1 : TONG QUAN TAI LIEU 12 1.
Luge sir tinh hinh nghien ciiu lectin tren the gidi va a Viet nam 12 1. L Luge sir ve lectin 12 1. Tinh hinh nghien ciiu lectin tren the gi6i va a Viet nam 15 1. Su phan bo lectin trong gidi sinh vat 20 1.
Su phan b6' lectin trong gi6i thuc vat 20 1. Su phan b6' lectin trong gi6i dong v^t 21 1. Lectin c6 ngubn goc vi sinh vat 22 1. Sir dinh khu cua lectin trong te bao va co the sinh vat 23 1.Cac tinh chat hoa hoc, sinh hoc, m i i n dich hoc cua lectin va ling dung 24 1.
Kh6'i lugng phan tir lectin 24 1. Cau tao phan tir lectin 26 1. Tinh chat ly, hoa hoc cua lectin 30 1. Tinh tan va ket tiia 30 1.
Thanh phan hoa hoc cua lectin 30 1. Su tuang tac cua lectin vdi cac loai duang 31 1. Anh hucfng cua m6t so tac nhan moi tru&ng den hoat do lectin „ 34 1. Tinh chat sinh hoc va mien dich hoc cua lectin 35 1.
Kha nang kich thich phan bao va ngung ket te bao 35 1. Vai tro ciaa lectin trong li6n ket vi khuan c6 dinh dam. Vai tro cua lectin doi vdi vi6c bao vt ca the sinh vat 42 1. Vai tro ciia lectin la cha't du trii va mang dac tinh enzim.
Uhg dung lectin trong d5i song 44 Chuang 2 : NGUYEN LIEU VA PHUONG P H A P NGHIEN CUU 47 2. Loai dau cove {Phaseolus vulgaris L. Loai dau guam {Canavalia gladiata jacq. Loai dau rua {Canavalia ensiformi s L.
Loai dau van {Lablab purpureus L. Ho dau tam {Moraceac) : Loai mit mat {Artocarpus heterophyllus Lamk) 51 2. Phuang phap nghien ciJu 53 2. Xtr ly va bao quan mSu thi nghiem 53 2.
Phuang phap tach lectin 54 2. Xac djnh ham lugng protein 54 2.Phuang phap xac dinh hoat d6 lectin 55 2. Tinh chd' lectin 56 2. Sac ky loc gel Sephadex G - 75 va G - 100 56 2.
Sac ky trao d6i ion DEAE - Xenluloza va DEAE - Trysacryl 56 2. Sac ky ai luc 56 2. ICiem tra do tinh sach va xac dinh khoi lugng phan tir lectin 58 2. Xac dinh mot s6' tinh chat sinh hoa cua lectin 59 2.
Phuang phap xac dinh thanh ph'an axit amin 62 2. Phan tich trinh tu axit amin tan ciing d'au N 63 2. Phuang phap tinh che IgAi 64 Chuang 3 : KET QUA VA BAN LUAN 66 3. Tinh che lectin iix 5 giong trbng loai dau cove {Phaseolus vulgaris L,) va nghien cihi tinh cha't ciia chiing 66 3.
Tinh ch6' lectin tir 5 giong trbng trong loai dau cove 66 3. Nghien ciiu so sanh m6t s6' tmh cha't sinh hoa cua lectin tir hat cua 5 gi6'ng trbng loai dau cove 71 3. Anh huang cua pH den hoat do lectin 71 3. Anh hucfng cua nhidt d6 m6i tru5ng 71 3.
Cac yeu t6 kich thich va kim ham hoat do lectin 72 3. Su tuang tac dac hieu dudng 74 3. Khbi lugng phan tu 76 3. Nhan xet chung 78 3.
Tinh che cac lectin tir hai loai dau ciing chi, dau guam {Canavalia gladiata jacq. DC) va dau rua (Canavalia ensiformis L. DC) va nghien ciiu so sanh m6t s6' tinh cha't ciia chung 79 3. Tinh ch€ lectin tir hat dau guam va dau rua 80 3.
Nghien ciiu so sanh mot s6' tinh cha't sinh hoa ciia lectin dau guam va dau rua 83 3. Anh huang cua pH moi trucrng 83 3. Su tuang tac vcfi cac loai dudng 84 3. So sanh cau tao phan tu 85 3.
Nhan xet chung 90 3. So sanh tinh cha't sinh hoa va ca'u tao phan tu cua lectin tir hai loai dau khac chi : Loai dau cove {Phaseolus vulgaris L. va loai dau guam (Canavalia gladiata jacq. So sanh m6t s6' tinh chat sinh hoa 91 3.
Anh hucfng cua nhiet d6 91 3. Anh hudng cua pH m6i trudng 92 3. Tuang tac dac hi6u ducfng 92 3. So sanh cau tao phan tii 92 3.
Nhan xet chung 95 3. Nghidn ciiu d6ng thai lectin trong qua trinh sinh truang va phat trien cua cay dau van den {Lablab purpureus L. Sweet) va tir hat cay mit mat {Artocarpus heterophyllus Lamk) 95 3. Nghien ciiu d6ng thai lectin tir cay dau van den 96 3.
Sir tich liiy lectin trong cac b6 phan ciia cay dau van den trong cac giai doan sinh truang va phat trien 96 3. Xac dinh m6t s6' dac diem sinh hoa ciia lectin cay dau van den 97 3. Nghien ciiu dong thai lectin trong qua trinh sinh truang cua hat cay mit mat 98 3. Tinh che lectin qua cac giai doan sinh truang cua hat mit mat 99 3.
M6t so tinh chat sinh hoa ciia lectin 104 3. Nhan xet chung 106 3. Uhg dung lectin mit mat : (Artocarpus heterophyllus Lamk) trong nghi6n ciiu chdn doan bdnh bazadd va benh vi^m gan sieu vi trung a ngu6i 107 3. Dieu che c6t Sepharose - 4B - LM 107 3.
Tinh che IgAi trong huyet thanh ngucfi binh thucrng va benh ly 108 3. Nhan xet chung 112 Chuang 4 : KET LUAN VA KHUYENNGHI 117 4. Khuy^'n nghi 11^ Tai lieu tham khao 12Q Phu luc 135 8 MO DAU Tren 100 nam trudc day (vao nam 1888) lectin da dugc phat hien va nghien ciiu. Ngay nay, cac nha khoa hoc da khang dinh ban cha't hoa hoc cua lectin chinh la nhOng protein va chu yeu la glycoprotein c6 mat a nhieu ca the dong vat, thuc vat, vi sinh vat va ca d ca the ngu5i.
Nhieu dac tinh hoa sinh cua lectin da dugc m6 ta. Cac lectin da dugc xac nhan la nhung cha't CO vai tro du tru eho te bao va ca the, c6 kha nang bao v6 va lam ngung ket te bao m6t each chon loc v. Viec kham pha ra kha nang tuang tac va nhan biet cac loai te bao cua lectin da md ra nhieu trien vong to Idn. M6t s6 dang lectin da dugc su dung nghien ciiu chan doan cac bdnh truyi^n nhilm vi chiing c6 kha nang tuang tac dac hieu vdfi mot s6 dang vi khuan va vinit (Sharon, 1979 ; Doyle, 1994).
Nhieu lectin c6 kha nang gay ngung ket tinh trung ngu5i nen da dugc nghien ciiu de sir dung chiing nhu m6t loai thuoc tranh thai (Chulavanatratol, 1987). M6t s6 dang lectin khac lai c6 kha nang kim ham su phat tri^n cua cac t^' bao di dang vi vay chiing da dugc sir dung d^ nghien ciiu chan doan benh ung thu (Bourillon, 1973 ; Marrink et al, 1990) hoac chan doan va phong ngira benh suy giam mi6n dich AIDS (Pineau et al, 1990). Nghien ciiu lectin d Viet nam da dugc ti^'n hanh hang chuc nam nay trong chuang trinh hgp tac nghien ciiu khoa hoc vdi trung tam khoa hoc quoc gia Phap (CNRS) va trudng dai hoc Paris 7. Nhimg ket qua nghien ciiu cua cac nha khoa hoc Viet nam da khang dinh : lectin rat pho bien trong cac ca th^ d6ng vat va thuc vat cua nu6c ta.
Trong sb cac lectin c6 ngubn gbc thuc vat, dang chii y nha't la lectin tii cac loai thu6c ho dau 9 {Fabaceae) va ho dau tam {Moraceae). Mot so cong trinh khoa hoc ve lectin thu6c hai ho nay da dugc c6ng bb (Nguy§n Qubc Khang va c6ng su, 1983, 1989 ; D6 Ngoc Lien va cong su, 1987^1991, 1992, 1993, 1994, 1995). Lectin tir cac loai thu6c ho Fabaceae va Moraceae c6 nhieu tiem nang Idn trong thuc tiln n^n chiing toi da tien hanh cac nghien ciiu sau han v'lS chiing. Do vay du6i su hudfng dan khoa hoc cua thay D6 Ngoc Lien, PGS.
PTS khoa hoc Sinh hoc, chung t6i da tie'n hanh tfe tai : 'Tinh che, nghien cihi m6t sb tinh chat ciia cac lectin tir mot sb loai thuoc ho dau {Fabaceae), ho dau tam {Moraceae) va kha nang ling dung trong y hoc". Muc dich dat ra eho luan an la : tien hanh nghien ciiu sau ve cau tnic phan tir va mot sb tinh chat sinh hoa cua cac dang lectin ke ca dong thai hoc cua chiing, trdn ca sd do tha'y dugc sir bien d6i cua lectin trong qua trinh sinh truang va phat trien cua ca the va trong qua trinh tien hoa cua loai. Tir do dinh hudng eho qua trinh khai thac lectin va su dung chiing trong nghien ciiu y hoc, sinh hoc va mitn dich. Mat khac khi sii dung mot vai dang lectin da tinh sach theo ti^u chuan qubc te dugc thuc hien trong dieu kien phong thi nghiem cua nude ta de nghien ciiu ling dung trong y hoc, luan an mubn dong gop nhung dan lieu khoa hoc ve tiem nang to Ibn cua cac lectin CO ngubn gbc noi dia Viet Nam trong viec bao v6 siic khoe cong dong dan t6c, van de c'an thi^'t dang dugc toan xa hCi quan tam.
De dat dugc muc dich do, nhi6m vu ca ban dat ra eho luan an la : - Tach, tinh chS' va nghien ciiu m6t sb tinh chat hoa sinh va cau tao phan tu cua cac dang lectin tii mbt sb loai cay ho dau {Fabaceae) va ho dau tam {Moraceae), 10 - Nghien ciiu d6ng thai lectin trong qua trinh sinh truang va phat trien ca the va cua b6 phan tir m6t vai loai thu6c hai ho thuc vat noi tren. - Nghien curu so sanh cau tnic phan tir va dac diem sinh hoa cua cac dang lectin di tha'y dugc su bien d6i cua lectin trong pham vi m6t loai va giiia cac loai khac nhau. - Sir dung lectin tir hat cay mit mat {Artocarpus heterophyllus Lamk) de nghien ciiu ung dung trong y hoc dua vao dac tinh mi^n dich cua no.
Nội dung được bảo vệ bản quyền — Tải xuống đầy đủ
Trích dẫn luận án này
Luận án tiến sĩ tinh chế nghiên cứu một số tính chất của các (n.d.) [Luận án tiến sĩ]. LuanAn.net. https://luanan.net/y-hoc/luan-an-tien-si-tinh-che-nghien-cuu-mot-so-tinh-chat-cua-cac-lectin-tu-mot-so-loai-thuoc-ho-dau-fabaceae-ho-dau-tam-moraceae-va-kha-nang-ung-dung-trong-y-hoc
Câu hỏi thường gặp
Luận án "Luận án tiến sĩ tinh chế nghiên cứu một số tính chất của các" nghiên cứu về vấn đề gì?
Luận án: Luận án tiến sĩ tinh chế nghiên cứu một số tính chất của các lectin từ một số loài thuộc họ đậu fabaceae họ đậu tằm moraceae và khả năng ứng dụng trong
Luận án "Luận án tiến sĩ tinh chế nghiên cứu một số tính chất của các" có bao nhiêu trang?
Luận án "Luận án tiến sĩ tinh chế nghiên cứu một số tính chất của các" có 138 trang. Bạn có thể xem trước một phần tài liệu ngay trên trang web trước khi tải về.
Cách tải luận án "Luận án tiến sĩ tinh chế nghiên cứu một số tính chất của các" về máy như thế nào?
Để tải luận án về máy, bạn nhấn nút "Tải xuống ngay" trên trang này, sau đó hoàn tất thanh toán phí lưu trữ. File sẽ được tải xuống ngay sau khi thanh toán thành công. Hỗ trợ qua Zalo: 0559 297 239.