Nghiên cứu sinh tổng hợp kháng sinh

‘ oon TRÌNH CONG none SINH OC i MÃ SỐ ï 52D (ed quan GHẾ mmïT : BỘ ĐH VÀ mHGN) —94449131119441444444131313 t2.saa~e NGHIÊN ctu SITNH TỔNG KHÁNG SINH HOp ERYTHROMYCIN. vi THỦY PHÂN PENICILLIN 6€ BẰNG ENZIM TAO GAPA MÃ SỐ : 52D,04.03 Chủ nhiệm đề tài : GS. Lê Quang Toàn Ngày 15/5/1991 “+3++ HÀNỘT 1986 - 1990 ses+—- 6.94 ONS ° THỈNH NhhiÊN cuu -1- NHƯNG NGƯỔI THAM GIÁ ĐỀ TẬT Pfs„ TỪ MINH KOÓNG DS, NGUYÊN THỊ XUNG - prs, cag yin THỰ Ds. NGUYỀM QUỐC outing DS.

PHAM VĂN dUyÊn D8GET DƯƠNG VĂN - ĐẠT KTV. NGUYÊN THT PHƯỞNG NGUYẰN TRƯỜNG NGUYEN — TIẾN — THỦY __ -- TUẾN KS. HOÀNG ANH, _ Đại Học Dược khoa Địt Hạo Dược khoe Đại học Dược khoả X nghiệp Hoa Baye XÍ nghiệp Hoá Dược Pet bán Pings Kho uyo Lyc * PHẦN ERYTHROMYCIN. - Đặt vấn đề I ~ Tổng quan tư liệu, TT = Phương pháp nghiên cứu.

TIT - Kẽt quả. IY = Két luận, PHN 6 APA = Đặt vấn đề 1 - Tổng quan tư liệu, IE ~- Phương pháp nghiên cứu. III ~Kết qua. IV = Kết luận.

PHĂN TÀI LIỆU THAM KHẢO : t ~ Phần Erythromycin. } II ~ Phần 6 APA. ovo + Chú ý ~ Tả6.1i6u này sử đụng đanh phấp *"-so qui định ede Bộ Y tế. max 8 Erythromycin 14 khang sinh thugc nhkém Macrolidé dược dùng xộng rãi trong Y học, chủ yêu chồng tí ghuẩn gram qưoug› nhật 1a logi ty cau đã khang peni ilin.

Độc tính thập + Wig ¢ +22°Ê (1v) ý 1600%8 (im) ; 2ouu"® (oral). Mồi năm hàng nghìn tần wrythromycin dược sắn xuất qưới các dạng muöi stearat, estolat, propionat ,. Theo sổ liệu cuấ UdUP năm 1978 , dhẹt sốn xuât 122 /năm với doanh sÖ- 30 tỷ yên. Sản lượng trên toàn thế giới ước tính 30001/wzm, “Phổ biểa.

` ở Việt dam brythranycin được sử dung ˆ diều tr} ede bệnh nhiễu khuẩ Š mọi lứa tuôi, nhất 1à với tod ` “- ` 2 - em va là khống sinh còn they “cẩm cao vi, iẾ kháng thuốc với nhiề loại khuân gây bệnh, ` Hằng năm ta nhập khoảng 32 tấn, trong dó ;aoT quối dạng gl va 10%dudd dang think phe, vign,cdc logd. Tuy ohu chu là cấp bếch nhưng công nghệ sản xuất Krythrmyain phức tạp hơn các khẩng sinh khác vù còa rẾt mới với nưốc ta, nod © trước khi nhộp công nghệ way phẩi kho sốt những diều kiện È trong nước và nhẾất Lầ cđhuên bị đôi ngũ cẩn bộ cổ kiển thức và ginh nghiện đồi với qìủ trình lên men nầy « bo đó chứng tôi da được đương trình Lông nghệ tính học ch@ phếp briển khai đề thi nghiên cứu "Sinh -. tổng hợøỹ khống sinh ` Brytromycin va tạo 6-ÄPA đo kháng sinh ban téng hyp". Myo tiéu cud a tài về phần Sryttronycin 13 3 4 - Suu tap chọn lạc chiagenoyt tfoh sinh t8ng hyp.

‘2 = Xée 1@p quy trình lên men iryttromycia & phous thf n@iign và trên thiết bị 50 - 100°. 3 - Khao sát phương phấp chiết và tính chế Rrytromycin ir moe es CC 62/2 0) MOM FU we Bau AUGY tem ( 2 /e NSM 924 Waaman tách riêng được 3 chất i Erythromycin 4, B va 6, £47 đều thuộc nhốn những kháng sinh Macrolid và được phiên loạt theo sổ carbon tròng phân tử , Macrolid gồm 3 nhốm kháng sinh /(5 7Ý với 94 chất ; vi ay: ` “ 12 ng yên tử © (Methymycin, Neamethymycin , YU 17). = 16 " CG (Carbonycin, Spiremycin, chalcomycin, 1aucomycia ,. 3e Theo Koyaia {67 vai tro culguaérolia là giải dộc các đường bất thường trong sinh vật ¿ nhóm 12 0 gắn mộE đường; 44 G gấn 2 đường; 16 G gắn môi disaooarid „ Tên Macrolie là do Weodwoff4 nghị năm 1957 / 7 7+.

~~ ⁄ fzrong các, #iacrolid trên dây, Erytronycin được sư dụng và sẵn xuất phổ biến nhất; sau dỗ 15 &§piramycin, 1eucomycin và (lemndomycin. Gần đây Tylosin (cũng do Mc Guire tim ra 1961) cung được chú ý „ Macrolia mới nhất do Àrnoux tim ra nan 1980 (8.7 18 chất 23612 8P cud hing Rhône - Poulenc. 2 - Hod sinh trong sinh ting hop. Cẩu tric phan tye cud Erytiromycin 48 duge nhiBu tac gid kh sất /29 , 10; 11, 12; 13; 147 gồm Z phần : aglycon va đường.

Phần aglyoon là một Erytronolio; dường gồm ‡ loại cô amin (desosamin) va không cổ anin (cladinose với Erytromycin A về L. Mycarose voi Brytwomycin B). œ aesosanin c1 agino ae (trytenak4 A) : ° se ý" Eruftữowwiecrv Á h Mycarose › Theo Gane /”157 nguyên tử O trong khung carbon cud Brytronolid 14 do nhém carboxy cua proprionat cung cfips Thực bế khung cơ bán cud Ezrylromycin da được chứng minh 1% t@ hep cuỗ nhiều phân tỞỶ propionab (cde gạch dậm trong cfu t ric @zén ), ` Việc sử dung tầm chất có mạch propionat trong sinh vồng hqp Brylromycin chính là xuất phất từ sự phát hiện cấu trúc trên đây và dã đem lại lợi ích lớn cho sẵn xuất. Nam 1967, Maztin và Hosenbrook đã dùng 1 chung 8W ©rythreusa đột biến 2@HU 153 y và Tararew, dyman (1964 ) dh„g chủng đột biến 9 E1 262 tạo zm được chất trung gian 6-obsoxy erytroaolid ä về chuyển được thành krybronolig B khi liên men.

/16 ; 177 „ uồng thời chứng minh rằng Eryéromycin B va ca G đều cố th chuyển thành Eryfroemycin Ânhờ chíng £&WU 153 (không sẵn xuất ra kryttromycin). dhững dũ “im trên đã di omphép ay city con đường sinh tổng ne #ry#rơnycin theo sơ đồ dưới tây 3 he aM ne st eythane sử t8 ps án. 3-0- eon bal ytron ycin Srytronycin c érytronoliad B 5-0 CH +e7(0 24 te ee (65-0) Luni? + (C59) Erytrenolia 8 Eryttronycin oe Erytironycin £9Z † () m== : =| 6 = beoxy Erytronolid B Heyiraayetn F ‘ Propionat (7 phân tử). R#£yfremycin E -_ 6 = Tuy nhiên cơ đế này chưa dược nhất tzẾ ¿ frong sơ đồ trên đây; hình như erytronolid a không phai lầ chất quan 3rọng đãi với sinh bổng hep cic.

Erythromycin v khá đung một chung đột biển khác 4TQG 31772 » Spagnali. £197 gần đây $1983)" aa chimg minh ring Xrytronolia 4 1à trung gian chủ yếu trong sinh bống hợp Srytromycin 4+ 5B, ©„ lùmo những phất hiện trên đây vẫn 1À nguyên nhân lầm tặng hiệu suất ninh tốïg hợp cấp nhiều lần so với phát hiện cuã Mc Guire. : 3 = 8y diều chiến cuả sinh tông pop Beyiromyoin + Kháng sinh Macrolid chịu tác động cuả nhiều cơ chế điề: chính trong sinh tông hợp. Vi đụ i” Nồng độ 6 va Na môi truờng, cùng với nồng độ cud phoaphát vô cơ vượt quá giới hạn đều không tạo va macrolid.

| Theo Goldstein va Sutter [20.7 , CO, |ầm giảm hiệu guất Lên men cuả Srytkronycin y flores Vv 8aaehez £ £†,ý chimg minh ring ion NH, và @orcoran £Œaz7 nhận thấy #rytrolia B ; 1h những nhân Ÿb đới hạn cu biệu suất Erythromycin trong sinh t8ag hop. ” my pOL vii k} thugt sinh hgc hiện đại những vấn a trong điển phải nghiên cứu 1Š các nhấn tö ức cht (feed back inhibétl on), cém vig cud enzim (inauction ef relevant enzyme ) về kích: tí chu trinh AMP néi t@ bao (etdmulation by intracellular cydic AWP), các nội dụng này vần đang tiếp tục được khếo adt nhin ứng dụng vho san xuất công nghiệp« 4 - qhững khŠo sất v8 ai nb_ting hop Exviromyein trope. Người ta nhên thấy trong môi trường phúc hGP› chung gm erythreus bắt đầu gư dung ngay lập tỨc nguồn hyarat - carbon va ngiSn dite, lim phát triện các khuân ty „ KỂ từ ngày thứ hai có thể xuất hiện axrykromycia với uống độ do được. sau đỗ lượng Brytromycin tăng }Ên theo tỷ 1ê Logardt cho dến khi hết nguồn hydrat carboa.

Một số bác "gia nhận thấy rồng chỉ khi đã tiêu thị hết nguồn đạm a8 phat triển sinh khdi thi khi do hydrat carbon mới tham gia vàe quá trình -T7~ sinh tồng hợp khống sinh. Vi vgy Snith cho ring sy cố mặt caa nguồn Nitơ hếp thụ được, lồ 1 nhân tố ức chế tổng hợp arytromycin - Gòn Brinbezg thi nhận thấy trong môi trường ngIẺo, tốc đô không xhí không ảnh hưởng gì, ngược lại ở môi trường giều, sự thông khí cao sẽ lầm tăng hiệu suất sinh tồng hợp srytrromycin. - Cerium nhén théy dung 2 Logi đạm đồng thơi : Nước ngấm ngồ (corn steep liquor) về muối sunfat (6Ÿ lệ O,B& : O,6%) thi hiộệi q\ả là Vỗi tu. = Musilek nhấn mạnh đến vai tro cấc acid smin trong môi trường lê men gồm saccarose, glutamin và muối sunfat.

Tuy nhiên trong các scádo amin da dung, thi nhiều tấc gia đều cho ring vallt cố hiệu quả cao nhất. Gắc tốc giả Ba Lan lại bấc bơ điề này, đứng mảnh š 1leucin cổ Lợi hơn về nhấn mạnh không cô acid smin nào khác có thể cùng 1Ề nguồn cung cếp cổ 0 về Ñ như leucin vì đu có thể tạo nhiều sinh khSi hơn nhưng không tăng t*ậi ait khang sinh. ~ B8iêng Bếtain dùng phối hợp với tyrosig vk glycin (ngi ồn Ne chÝnh) cho kết qua ro rệt , Trơng dé, Betain 18 ngudn tgo nhém metyl theo sơ đồ qươi dây :. Btein eT CDimetylglycia, ———~ “an Homocystein methionia Gl yoxylat veng chi ¥ 1& khi két thic qué trinh 1én men(thuong 1am vao ngay tau séu) lwong céc acio amin từng lên ? có thể nghĩ rì dé 18 ao su ty tiéu cud các _ khuận ty ching ? - lổi vơi ngàồn carbon hyarat , saccarose thường được coi 1h tét nhất, vẦ nếu chỉ dung mệt minh glucose tHằ nguồn © sẽ nhanh chống cạn và _pR se giảm, do tạo thadh cáo seiú Hữu œ„ VÀ nếu ta bổ sung Bydra? carbon thì hiệu suế erytromycin - vẫn không tầng.

Tzrếi lại khi nồng độ kháng sinh đã ngừng từng; ta cho thêu đồng thời glycin va saccarose vào nồi la men thi erytremycin lại bắt dầu tăng thêm. - V8 các chất võ cơ : nhủ a về Mẹ và P Hành như không thể thiểu, ngoồi re còn Fe , ; dị và Ca cũng -B~ ° cần thiết. Người ta nhận thấy rất rõ nếu không cho je phosphat hoặc Kali phosphat teong méi trương thà cổ sự phẩt triển quả sinh kHối,lẫn hiệu suất sinh tống hợp khống sinh đều rất kếm , Hiện tượng này đã được Omura và Taneka giai thich và chứng mảnh đổi với nhiều Mgcrolia [237 : Ion NH, (cho vào môi trường hay sỉnh ra trong quá trình tro đổi chất) sŠ ức chế sinh tông hợp các Macrolid. ag Pho sphat » Canxi phosphat va JZeolit hấp thụ các lon NH, lầm giảm nồng đô NH, tzong môi trường, nhờ để lm tag sự hình thanh khéng sinh.