Luận án tiến sĩ nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tinh ống nghiệm ở bệnh
Luận án: Luận án tiến sĩ nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tinh ống nghiệm ở bệnh nhân hội chứng buồng trứng đa nang. Xem tóm tắt và tải về tại LuanAn.ne
Năm xuất bản
Số trang
167
Thời gian đọc
26 phút
Lượt xem
0
Lượt tải
0
Phí lưu trữ
50 Point
Tổng quan nhanh
- Chủ đề:
- Nghiên cứu hình thái phôi
- Số trang:
- 167 trang
- Trường:
- Học viện Quân Y
- Chuyên ngành:
- Khoa học Y sinh
- Tác giả:
- Đoàn Xuân Kiên
- Năm:
- 2021
Tóm tắt nội dung luận án
I.Nghiên cứu hình thái phôi
Nghiên cứu về hình thái phôi và kết quả thụ tinh trong ống nghiệm ở bệnh nhân hội chứng buồng trứng đa nang.
1.1. Đánh giá hình thái phôi
Đánh giá hình thái phôi nuôi cấy trong ống nghiệm và phân loại phôi.
1.2. Kết quả thụ tinh
Kết quả thụ tinh trong ống nghiệm và tỉ lệ thụ tinh thành công.
II.Hội chứng buồng trứng đa nang
Hội chứng buồng trứng đa nang là một trong những nguyên nhân chính gây vô sinh ở phụ nữ.
2.1. Định nghĩa và tiêu chuẩn chẩn đoán
Định nghĩa và tiêu chuẩn chẩn đoán hội chứng buồng trứng đa nang.
2.2. Tỉ lệ lƣu hành
Tỉ lệ lƣu hành của hội chứng buồng trứng đa nang ở phụ nữ.
III.Phương pháp nghiên cứu
Phương pháp nghiên cứu được sử dụng để đánh giá hình thái phôi và kết quả thụ tinh.
3.1. Thiết kế nghiên cứu
Thiết kế nghiên cứu được sử dụng để đánh giá hình thái phôi và kết quả thụ tinh.
3.2. Quy trình nghiên cứu
Quy trình nghiên cứu được sử dụng để đánh giá hình thái phôi và kết quả thụ tinh.
IV.Kết quả nghiên cứu
Kết quả nghiên cứu về hình thái phôi và kết quả thụ tinh trong ống nghiệm.
4.1. Đặc điểm chung của đối tượng nghiên cứu
Đặc điểm chung của đối tượng nghiên cứu về hình thái phôi và kết quả thụ tinh.
4.2. Kết quả điều trị vô sinh
Kết quả điều trị vô sinh ở bệnh nhân hội chứng buồng trứng đa nang.
V.Kết luận
Kết luận về nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tinh trong ống nghiệm.
5.1. Kết luận chính
Kết luận chính về nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tinh.
5.2. Hướng phát triển tương lai
Hướng phát triển tương lai về nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tinh.
Tải xuống file đầy đủ để xem toàn bộ nội dung
Tải đầy đủ (167 trang)Nội dung chính
Tổng quan về luận án
Hội chứng buồng trứng đa nang (HCBTĐN - Polycystic Ovary Syndrome) là một trong những rối loạn nội tiết chuyển hóa phổ biến nhất ở phụ nữ trong độ tuổi sinh sản, chiếm tới 80% các trường hợp vô sinh do rối loạn phóng noãn mạn tính. Trong thực hành hỗ trợ sinh sản (Assisted Reproductive Technology - ART), việc kích thích buồng trứng (KTBT) đối với bệnh nhân HCBTĐN luôn đặt ra thách thức lớn do nguy cơ phát triển hội chứng quá kích buồng trứng (HCQKBT - Ovarian Hyperstimulation Syndrome). Biến chứng cấp tính nghiêm trọng này không chỉ làm tăng tỷ lệ nhập viện gấp đôi so với nhóm bệnh nhân thông thường mà còn đe dọa trực tiếp tính mạng người bệnh. Trong nhiều thập kỷ, phác đồ dài phối hợp chất đồng vận GnRH (GnRH agonist) với kích hoạt trưởng thành noãn sau cùng bằng human Chorionic Gonadotropin (hCG) được xem là tiêu chuẩn cổ điển. Tuy nhiên, thời gian bán hủy kéo dài của hCG (khoảng 2,32 ngày so với 60 phút của Luteinizing Hormone - LH nội sinh) dẫn đến kích thích kéo dài các hoàng thể, làm tăng vọt yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (VEGF) và khởi phát HCQKBT nặng.
Sự phát triển của phác đồ GnRH đối vận (GnRH antagonist) kết hợp sử dụng GnRH đồng vận liều duy nhất để khởi động trưởng thành noãn (trigger) đã tạo nên bước ngoặt sinh lý học. Cơ chế kích thích giải phóng đỉnh LH và FSH nội sinh tức thời (hiệu ứng flare-up) mô phỏng sát chu kỳ tự nhiên, làm giảm thiểu thời gian tác động lên thụ thể LHCGR và loại bỏ gần như hoàn toàn nguy cơ HCQKBT. Dù vậy, một khoảng trống nghiên cứu (research gap) trọng yếu tồn tại: sự sụt giảm nhanh nồng độ gonadotropin và steroid pha hoàng thể dấy lên lo ngại về chất lượng tế bào noãn, tiềm năng phân chia hình thái phôi ngày 3 và kết quả làm tổ khi áp dụng trên các phân nhóm kiểu hình HCBTĐN khác nhau. Luận án tiến sĩ Y học của tác giả Đoàn Xuân Kiên (chuyên ngành Khoa học y sinh, mã số 972 0101, Học viện Quân Y, 2021) đã giải quyết trọn vẹn khoảng trống này thông qua hai câu hỏi nghiên cứu cốt lõi:
- Câu hỏi nghiên cứu 1 (Q1): Phác đồ GnRH đối vận phối hợp trưởng thành noãn bằng GnRH đồng vận tác động như thế nào đến các chỉ số hình thái noãn và phân loại chất lượng phôi ngày 3 theo hệ thống tiêu chuẩn Đồng thuận Alpha (Istanbul 2011) trên từng phân nhóm kiểu hình HCBTĐN?
- Câu hỏi nghiên cứu 2 (Q2): Mối tương quan giữa các đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng (nồng độ AMH, chỉ số FTI, thể tích buồng trứng) với kết quả điều trị vô sinh (tỷ lệ làm tổ, tỷ lệ thai lâm sàng, tỷ lệ thai tiến triển) giữa các nhóm kiểu hình HCBTĐN diễn ra theo quy luật nào?
Khung lý thuyết của công trình tích hợp lý thuyết thụ thể trục hạ đồi - tuyến yên - buồng trứng (Hypothalamic-Pituitary-Ovarian Axis Theory), phân loại kiểu hình Rotterdam 2003 (Phenotypes A, B, C, D) và hệ thống đánh giá hình thái phôi học hiện đại ESHRE/Alpha 2011. Nghiên cứu thực hiện trên mẫu bệnh nhân HCBTĐN chỉ định làm thụ tinh trong ống nghiệm (TTON) tại Viện Mô phôi lâm sàng quân đội và Trung tâm Hỗ trợ sinh sản - Bệnh viện Sản Nhi Phú Thọ, cung cấp bằng chứng định lượng vững chắc giúp cá thể hóa phác đồ điều trị vô sinh an toàn tuyệt đối.
Literature Review và Positioning
Lịch sử nghiên cứu HCBTĐN ghi nhận sự tiến triển phức tạp từ mô tả hình thái ban đầu của Stein và Leventhal (1935) với tam chứng kinh thưa - buồng trứng đa nang - rậm lông, qua tiêu chuẩn Viện Y tế Quốc gia Hoa Kỳ (NIH 1990) nhấn mạnh vào tình trạng cường androgen và rối loạn phóng noãn, đến Đồng thuận Rotterdam 2003 của Hiệp hội Sinh sản và Phôi học Châu Âu (ESHRE) phối hợp Hiệp hội Y học Sinh sản Hoa Kỳ (ASRM). Rotterdam 2003 đã mở rộng chẩn đoán thành 4 kiểu hình: Kiểu hình A (HA + OD + PCOM), Kiểu hình B (HA + OD), Kiểu hình C (HA + PCOM), và Kiểu hình D (OD + PCOM). Tuy nhiên, trường phái Hiệp hội Cường Androgen và HCBTĐN (AE-PCOS 2006) do Azziz R. và cộng sự khởi xướng lại phản đối việc công nhận Kiểu hình D, cho rằng cường androgen (HA) mới là động lực sinh lý bệnh cốt lõi. Sự phân hóa này dẫn đến nhiều tranh luận quốc tế về đáp ứng điều trị vô sinh giữa các kiểu hình.
Trong kích thích buồng trứng phục vụ TTON, y văn quốc tế chứng kiến cuộc tranh luận sâu sắc về hiệu quả của GnRH đồng vận trong khởi động trưởng thành noãn. Giai đoạn 2005 - 2006, các thử nghiệm lâm sàng ngẫu nhiên của Humaidan P. và cộng sự (2005) cũng như Kolibianakis E.M. và cộng sự (2005) ghi nhận tỷ lệ noãn MII đạt mức cao (lên tới 84 ± 18%), triệt tiêu hoàn toàn HCQKBT, nhưng tỷ lệ sảy thai sớm lại tăng đột biến (79% so với 4% ở nhóm hCG) và tỷ lệ thai lâm sàng giảm sút nghiêm trọng (6% so với 36%) do suy hoàng thể nặng. Phân tích gộp Cochrane của Youssef M.A. và cộng sự (2014) trên 17 thử nghiệm lâm sàng đối chứng (1.847 bệnh nhân) đã xác nhận việc chuyển phôi tươi sau trigger bằng GnRH đồng vận làm giảm tỷ lệ trẻ sinh sống. Từ đây, chiến lược "Freeze-all" (đông lạnh toàn bộ phôi để chuyển trong chu kỳ rã đông) ra đời như một giải pháp cứu cánh.
So sánh với các nghiên cứu quốc tế, công trình của Ma Y. và cộng sự (2010) tại Trung Quốc ghi nhận Kiểu hình A chiếm đa số (31,0%), trong khi nghiên cứu của Yildiz B.O. và cộng sự (2012) tại Thổ Nhĩ Kỳ lại ghi nhận sự ưu thế của các phân nhóm khác. Tại Việt Nam, nghiên cứu của Cao Ngọc Thành và cộng sự (2019) chỉ ra Kiểu hình D chiếm tỷ lệ cao nhất (67,6%). Luận án của tác giả Đoàn Xuân Kiên định vị tiên phong bằng cách khảo sát trực tiếp mối liên hệ giữa phác đồ đối vận - trigger đồng vận với chi tiết vi hình thái phôi ngày 3 (tỷ lệ phân mảnh bào tương, tính đồng đều phôi bào, hiện tượng đa nhân) đối sánh trên từng kiểu hình Rotterdam tại Việt Nam, lấp đầy khoảng trống dữ liệu phôi học lâm sàng mà các nghiên cứu trước đây của Babayof I. (2006) hay Griesinger G. (2006) chưa phân tầng chi tiết.
Đóng góp lý thuyết và khung phân tích
Đóng góp cho lý thuyết
Luận án mở rộng thuyết Động lực học Thụ thể Tuyến yên và Nội tiết Pha hoàng thể (Pituitary Receptor Dynamics and Luteal Endocrinology Theory) khi chứng minh rằng đỉnh LH/FSH nội sinh ngắn hạn do Triptorelin 0,2 mg tạo ra (kéo dài 24 - 36 giờ) hoàn toàn đủ ngưỡng sinh học để tái khởi động quá trình giảm phân của noãn từ giai đoạn túi nhân (Germinal Vesicle - GV) tiến tới kỳ giữa II (Metaphase II - MII), kích hoạt sự di chuyển của các hạt vỏ (cortical granules) ngăn ngừa hiện tượng đa thụ tinh mà không làm tổn hại cấu trúc thoi vô sắc.
Mô hình lý thuyết được xác lập qua hai mệnh đề chính:
- Mệnh đề 1 (Proposition 1): Khởi động trưởng thành noãn bằng GnRH đồng vận trong phác đồ GnRH đối vận bảo toàn năng lực phát triển của noãn và động học phân bào, tạo ra tỷ lệ noãn MII và phôi chất lượng tốt (Đồng thuận Alpha) tương đương hoặc vượt trội so với phác đồ hCG truyền thống trên quần thể bệnh nhân HCBTĐN.
- Mệnh đề 2 (Proposition 2): Các phân nhóm kiểu hình HCBTĐN có sự không đồng nhất về gánh nặng chuyển hóa và nồng độ androgen tự do (FTI), dẫn tới sự khác biệt về số lượng noãn chiêu mộ nhưng không làm suy giảm chất lượng nội tại của hình thái phôi ngày 3 khi được nuôi cấy trong điều kiện tiêu chuẩn hóa.
Khung phân tích độc đáo
Khung phân tích của luận án tích hợp ba trụ cột lý thuyết: (1) Thuyết Trục Thần kinh Nội tiết Sinh sản Kisspeptin-GnRH-LH/FSH; (2) Hệ thống phân loại Kiểu hình Đa yếu tố Rotterdam 2003; và (3) Thuyết Đánh giá Động học Hình thái Phôi phân chia (Cleavage Embryo Morphology Scoring Model) theo Đồng thuận Alpha/ESHRE 2011.
Khung phân tích thiết lập ma trận đánh giá đa chiều gồm 4 biến số hình thái vi thể độc lập:
- Số lượng phôi bào (Blastomere Cell Count): Định mức tối ưu 8 tế bào tại thời điểm 67 - 69 giờ sau tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI).
- Mức độ phân mảnh bào tương (Cytoplasmic Fragmentation): Phân tầng theo 3 ngưỡng: Mức độ 1/Tốt (< 10%), Mức độ 2/Trung bình (10 - 25%), Mức độ 3/Xấu (> 25%).
- Tính đồng đều của phôi bào (Blastomere Symmetry): Đánh giá độ chênh lệch đường kính phôi bào không vượt quá 25% dựa trên quy chuẩn hình thái học của Prados F. và cộng sự (2012).
- Tình trạng đa nhân (Multinucleation): Kiểm soát bất thường phân bào nhân tế bào.
Điều kiện biên (boundary conditions) của khung lý thuyết được giới hạn chặt chẽ ở nhóm phụ nữ HCBTĐN vô sinh thực hiện kỹ thuật ICSI kết hợp chiến lược đông phôi toàn bộ (freeze-all) và chuẩn bị niêm mạc tử cung tối ưu trong chu kỳ chuyển phôi đông lạnh (FET).
Phương pháp nghiên cứu tiên tiến
Thiết kế nghiên cứu
Luận án theo đuổi thế giới quan thực chứng (positivism paradigm) với thiết kế nghiên cứu tiến cứu, mô tả cắt ngang kết hợp theo dõi dọc can thiệp lâm sàng không đối chứng (prospective cohort study). Thiết kế nhiều tầng (multilevel design) cho phép đánh giá đồng thời từ cấp độ phân tử/nội tiết (nồng độ LH, E2, AMH, Testosterone, SHBG), cấp độ tế bào/mô học (noãn GV, MI, MII, phôi ngày 3 loại 1, 2, 3) đến cấp độ kết quả lâm sàng (tỷ lệ làm tổ, thai lâm sàng, thai sinh hóa, sảy thai, HCQKBT).
Tiêu chuẩn lựa chọn mẫu chuẩn hóa theo Rotterdam 2003 (thỏa mãn ít nhất 2 trong 3 tiêu chí: Rối loạn phóng noãn - OD; Cường androgen lâm sàng/sinh hóa - HA với chỉ số FTI > 6 hoặc điểm rậm lông Ferriman-Gallwey cải tiến mFG ≥ 8; Hình thái buồng trứng đa nang trên siêu âm - PCOM với ≥ 12 nang kích thước 2 - 9 mm trên một mặt cắt hoặc thể tích buồng trứng > 10 cm³ tính theo công thức Elip: $V = 0{,}523 \times \text{dài} \times \text{rộng} \times \text{dày}$). Tiêu chuẩn loại trừ bao gồm: suy buồng trứng sớm, bất thường nhiễm sắc thể vợ/chồng, tổn thương thực thể buồng tử cung (dính buồng tử cung, u xơ dưới niêm mạc), các bệnh lý nội tiết khác (tăng tiết prolactin máu, rối loạn chức năng tuyến giáp, hội chứng Cushing).
Quy trình nghiên cứu rigorous
Quy trình lâm sàng và labo phôi học được kiểm soát sai số nghiêm ngặt theo các pha chuẩn:
- KTBT: Sử dụng phác đồ GnRH đối vận linh hoạt (flexible antagonist protocol) bắt đầu từ ngày 2 - 3 chu kỳ kinh với liều rFSH khởi đầu cá thể hóa (112,5 - 150 IU/ngày). Khi nang noãn đạt kích thước ≥ 14 mm hoặc sau 5 ngày tiêm FSH, bổ sung GnRH đối vận (Cetrorelix/Ganirelix 0,25 mg/ngày) cho đến ngày tiêm trưởng thành noãn.
- Khởi động trưởng thành noãn (Trigger): Tiêm GnRH đồng vận (Triptorelin 0,2 mg / Diphereline hoặc Decapeptyl) khi có ít nhất 2 nang đạt kích thước ≥ 17 mm.
- Chọc hút noãn và ICSI: Thực hiện sau 35 - 36 giờ tiêm trigger. Tế bào hạt và vành tia được loại bỏ hoàn toàn bằng men hyaluronidase để đánh giá chính xác độ trưởng thành nhân (noãn GV, MI, MII) dưới kính hiển vi đảo ngược độ phóng đại 400x.
- Nuôi cấy và Đánh giá phôi: Đánh giá thụ tinh sau 16 - 18 giờ (quan sát 2 tiền nhân 2PN). Đánh giá chất lượng phôi ngày 3 tại thời điểm 67 - 69 giờ tính từ thời điểm tiêm tinh trùng theo Đồng thuận Quốc tế Alpha (2011). Toàn bộ phôi đủ tiêu chuẩn được bảo quản đông lạnh bằng kỹ thuật thủy tinh hóa (vitrification).
Data và phân tích
Dữ liệu được thu thập trên bệnh án nghiên cứu đồng bộ, số hóa và xử lý thống kê bằng phần mềm SPSS phiên bản 20.0. Các biến định lượng được trình bày dưới dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn ($\text{Mean} \pm \text{SD}$), so sánh giữa các phân nhóm kiểu hình bằng kiểm định ANOVA một yếu tố (One-way ANOVA) hoặc Kruskal-Wallis. Các biến định tính được trình bày dưới dạng tần số và tỷ lệ phần trăm (%), kiểm định mối liên quan bằng Chi-square ($\chi^2$) hoặc Fisher's Exact Test. Mức ý nghĩa thống kê được xác lập tại ngưỡng $p < 0{,}05$ với khoảng tin cậy 95% (95% CI).
Phát hiện đột phá và implications
Những phát hiện then chốt
Luận án mang lại 5 phát hiện then chốt mang tính đột phá thực nghiệm:
- Cơ cấu phân bố kiểu hình: Kiểu hình D (không cường androgen: OD + PCOM) chiếm tỷ lệ áp đảo cao nhất trong quần thể nghiên cứu tại Việt Nam với 65,8%, tiếp theo là Kiểu hình A (cổ điển toàn diện: HA + OD + PCOM) chiếm 20,7%, Kiểu hình C (có phóng noãn: HA + PCOM) chiếm 8,5% và Kiểu hình B (không có hình ảnh đa nang: HA + OD) chiếm tỷ lệ thấp nhất 5,0%.
- Chỉ số trưởng thành noãn và chất lượng giao tử vượt trội: Tỷ lệ thu hồi noãn trưởng thành MII đạt mức rất cao, bình quân $82{,}4% - 85{,}1%$ trên tổng số noãn chọc hút được; số noãn MII trung bình thu được dao động từ $14{,}2 \pm 6{,}8$ đến $18{,}6 \pm 7{,}2$ noãn/bệnh nhân. Không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê về tỷ lệ noãn MII giữa 4 nhóm kiểu hình ($p > 0{,}05$), chứng minh GnRH đồng vận có hiệu lực kích hoạt thụ thể tuyến yên đồng nhất bất kể nền tảng chuyển hóa androgen.
- Đặc điểm vi hình thái phôi ngày 3 lý tưởng: Tỷ lệ tạo phôi phân chia đạt $90{,}2%$; trong đó tỷ lệ phôi ngày 3 có chất lượng tốt (Mức 1 theo Alpha: 8 phôi bào đồng đều, mảnh vỡ bào tương < 10%, không đa nhân) chiếm tỷ lệ cao $61{,}4%$, phôi trung bình chiếm $28{,}2%$, và phôi xấu chỉ chiếm $10{,}4%$. Tỷ lệ phân mảnh bào tương < 10% chiếm đa số ($68{,}5%$), tỷ lệ phôi bào đa nhân được kiểm soát ở mức cực thấp ($< 2{,}1%$).
- Hiệu quả điều trị vô sinh và kết quả thai kỳ ấn tượng: Trong các chu kỳ chuyển phôi trữ rã đông (FET), tỷ lệ $\beta\text{hCG}$ dương tính đạt $63{,}2%$, tỷ lệ phôi làm tổ đạt $34{,}8%$, tỷ lệ có thai lâm sàng (quan sát thấy túi ối và tim thai trên siêu âm) đạt $54{,}7%$, và tỷ lệ thai tiến triển đạt $48{,}3%$. Tỷ lệ thai lưu và sảy thai tự nhiên được khống chế ở mức $8{,}5%$, tương đương với nhóm phụ nữ không mắc HCBTĐN.
- Xóa bỏ hoàn toàn biến chứng HCQKBT nặng: Trong toàn bộ nhóm nghiên cứu được trigger bằng GnRH đồng vận kết hợp chiến lược đông phôi toàn bộ, tỷ lệ mắc HCQKBT mức độ trung bình và nặng ghi nhận chính xác là $0{,}0%$. Hiện tượng ứ dịch màng bụng, cô đặc máu hoặc nhập viện do biến chứng hoàn toàn bị triệt tiêu, khẳng định tính an toàn tuyệt đối của phác đồ.
Implications đa chiều
- Về mặt lý thuyết: Nghiên cứu bác bỏ định kiến cho rằng cường androgen mạn tính gây tổn hại không thể đảo ngược lên cấu trúc thoi phân bào và bộ máy phân chia của phôi ngày 3. Đồng thời xác lập cơ chế: khi giải phóng buồng trứng khỏi tác động kéo dài của hCG và môi trường nội tiết kích thích quá mức tại chu kỳ tươi, tiềm năng phát triển của phôi HCBTĐN hoàn toàn bình thường.
- Về mặt phương pháp luận: Cung cấp quy chuẩn thực hành đánh giá hình thái phôi ngày 3 nghiêm ngặt dựa trên Đồng thuận Alpha, chuẩn hóa hệ thống phân loại phôi cho các trung tâm ART tại Việt Nam.
- Về mặt ứng dụng lâm sàng: Xác lập phác đồ chuẩn mực mang tính "kim chỉ nam": GnRH đối vận + Trigger GnRH đồng vận (Triptorelin 0,2 mg) + ICSI + Nuôi cấy phôi ngày 3 đánh giá theo Alpha 2011 + Thủy tinh hóa đông phôi toàn bộ + Chuyển phôi đông lạnh. Phác đồ này tối ưu hóa tỷ lệ sinh sống tích lũy đồng thời biến can thiệp TTON ở bệnh nhân HCBTĐN thành một quy trình "OHSS-free clinic" (phòng khám không quá kích buồng trứng).
- Về mặt chính sách y tế: Giảm thiểu gánh nặng chi phí y tế khổng lồ từ việc điều trị cấp cứu hồi sức các ca HCQKBT nặng, rút ngắn số ngày nằm viện và tối ưu hóa chi phí điều trị cho người bệnh vô sinh.
Limitations và Future Research
Luận án thẳng thắn thừa nhận một số giới hạn nghiên cứu:
- Quy mô không gian: Dữ liệu thu thập chủ yếu tại hai trung tâm hỗ trợ sinh sản lớn ở miền Bắc (Viện Mô phôi lâm sàng quân đội và Bệnh viện Sản Nhi Phú Thọ), chưa bao quát toàn bộ đặc điểm nhân khẩu học và lối sống của bệnh nhân đa vùng miền trên toàn quốc.
- Giới hạn công nghệ đánh giá phôi: Nghiên cứu đánh giá hình thái phôi tại các thời điểm tĩnh (static morphology) dưới kính hiển vi quang học ngày 3, chưa áp dụng hệ thống chụp ảnh liên tục theo dõi động học phôi (Time-lapse morphokinetics) để ghi nhận các mốc phân bào chính xác từng phút ($t_2, t_3, t_4, t_8, cc_2, s_2$).
- Thiếu hụt dữ liệu di truyền và nuôi cấy phôi nang: Chưa thực hiện nuôi cấy kéo dài lên giai đoạn phôi ngày 5 (Blastocyst) trên toàn bộ mẫu và chưa tích hợp kỹ thuật xét nghiệm di truyền tiền làm tổ (PGT-A) để xác định tỷ lệ lệch bội (aneuploidy) tương ứng với từng kiểu hình.
Chương trình nghiên cứu tương lai định hướng 4 trọng tâm:
- Ứng dụng trí tuệ nhân tạo (AI) kết hợp Time-lapse để nhận diện tự động các bất thường vi cấu trúc phôi bào ở bệnh nhân HCBTĐN.
- Phân tích đa omics (Metabolomics dịch nang noãn và Transcriptomics tế bào hạt cumulus) nhằm tìm kiếm các dấu ấn sinh học phân tử dự báo chất lượng noãn.
- Thử nghiệm lâm sàng đa trung tâm đánh giá tỷ lệ trẻ sinh sống tích lũy (Cumulative Live Birth Rate - CLBR) giữa chiến lược chuyển đơn phôi nang (eSET) ngày 5 so với phôi ngày 3.
- Theo dõi sức khỏe chu sinh và sự phát triển thể chất, tâm thần vận động dài hạn của trẻ sinh ra từ phác đồ GnRH agonist trigger kết hợp đông phôi toàn bộ.
Tác động và ảnh hưởng
Công trình tạo ra tác động học thuật sâu rộng với dự báo trích dẫn cao trong các tài liệu chuyên khảo về Nội tiết sinh sản và Hỗ trợ sinh sản tại Việt Nam. Về mặt thực hành lâm sàng, nghiên cứu đã thúc đẩy sự chuyển dịch mô hình điều trị (paradigm shift) tại hàng loạt trung tâm IVF trên cả nước: thay thế hoàn toàn phác đồ dài đồng vận cũ bằng phác đồ GnRH đối vận, chuyển đổi tác nhân trigger từ hCG sang GnRH đồng vận cho nhóm bệnh nhân có nguy cơ cao.
Về mặt kinh tế - xã hội, nghiên cứu đem lại lợi ích kép: bảo đảm an toàn sinh mạng tối đa cho người phụ nữ, xóa bỏ nỗi sợ hãi về biến chứng quá kích buồng trứng, đồng thời duy trì tỷ lệ thành công thai kỳ vượt trên 50%, mang lại hạnh phúc cho hàng ngàn gia đình hiếm muộn. Trên trường quốc tế, công trình đóng góp bộ dữ liệu quý giá về phân bố kiểu hình và đặc điểm sinh học phôi học của phụ nữ Đông Nam Á vào bản đồ dịch tễ học HCBTĐN toàn cầu.
Đối tượng hưởng lợi
- Nghiên cứu sinh và Giảng viên Y Dược: Tiếp cận một công trình mẫu mực về phương pháp luận nghiên cứu Y sinh học, quy trình chuẩn hóa biến số và phương pháp phân tích thống kê y học chuyên sâu.
- Bác sĩ Lâm sàng Sản Phụ khoa và Hỗ trợ sinh sản: Nắm vững cơ sở khoa học để tự tin chỉ định phác đồ GnRH đối vận, cá thể hóa liều lượng FSH khởi đầu và sử dụng GnRH đồng vận trigger an toàn tuyệt đối cho bệnh nhân HCBTĐN.
- Chuyên viên Phôi học (Embryologists): Sở hữu quy chuẩn chi tiết về đánh giá hình thái học giao tử và phôi ngày 3 theo chuẩn Đồng thuận Quốc tế Alpha 2011, nâng cao độ chính xác trong phân loại và lựa chọn phôi chuyển.
- Nhà hoạch định Chính sách Y tế và Quản lý Bệnh viện: Có căn cứ khoa học thực chứng để xây dựng phác đồ điều trị chuẩn quốc gia, tối ưu hóa ngân sách bảo hiểm y tế và nâng cao chất lượng dịch vụ chăm sóc sức khỏe sinh sản.
Câu hỏi chuyên sâu
1. Đóng góp lý thuyết độc đáo nhất của luận án là gì? Luận án đã mở rộng thuyết Động lực học Thụ thể Tuyến yên trong pha hoàng thể, chứng minh rằng đỉnh LH/FSH nội sinh ngắn hạn kích hoạt bởi GnRH đồng vận hoàn toàn đủ khả năng tạo ra sự trưởng thành hoàn chỉnh về cả nhân (nuclear maturation) và bào tương (cytoplasmic maturation) của noãn, đồng thời phôi tạo ra có chất lượng vi hình thái ngày 3 tương đương sinh lý tự nhiên mà không phụ thuộc vào tình trạng cường androgen nền tảng của bệnh nhân.
2. Điểm đổi mới phương pháp luận so với các nghiên cứu trước đây là gì? So với các nghiên cứu của Chen Z.J. và cộng sự (2016) hay Devroey P. và cộng sự (2004) vốn chỉ khảo sát các chỉ tiêu lâm sàng gộp, luận án đã thực hiện phương pháp vi phân tích hình thái phôi ngày 3 ở mức độ tinh vi: định lượng tỷ lệ phân mảnh bào tương theo 3 phân mức, đánh giá tính đồng đều phôi bào theo quy chuẩn Prados F. (chênh lệch đường kính < 25%) và kiểm soát tình trạng đa nhân, đối chiếu chéo trên cả 4 phân nhóm kiểu hình Rotterdam 2003 tại một quần thể duy nhất.
3. Phát hiện bất ngờ nhất từ dữ liệu thực nghiệm là gì? Phát hiện bất ngờ nhất là Kiểu hình A (cường androgen nặng kết hợp rối loạn phóng noãn và buồng trứng đa nang) dù có nồng độ AMH và số lượng nang noãn thứ cấp (AFC) cao nhất, có nguy cơ quá kích tiềm tàng cao nhất, nhưng khi được trigger bằng GnRH đồng vận lại cho số lượng noãn MII và số lượng phôi loại 1 ngày 3 tuyệt đối cao nhất, với tỷ lệ làm tổ trong chu kỳ chuyển phôi trữ không hề thua kém các kiểu hình nhẹ như Kiểu hình D hay C ($p > 0{,}05$).
4. Nghiên cứu có cung cấp giao thức tái lặp (Replication Protocol) chuẩn xác không? Có. Toàn bộ quy trình kích thích buồng trứng bằng phác đồ đối vận linh hoạt, liều lượng Triptorelin 0,2 mg trigger tại thời điểm nang $\ge 17\text{ mm}$, thời gian chọc hút noãn 35 - 36 giờ, kỹ thuật bóc tách tế bào hạt bằng hyaluronidase, quy trình ICSI, môi trường nuôi cấy và mốc đánh giá phôi 67 - 69 giờ theo Alpha Consensus 2011 đều được mô tả chi tiết, cho phép bất kỳ trung tâm IVF chuẩn hóa nào cũng có thể tái lặp quy trình với độ tin cậy tuyệt đối.
5. Lộ trình nghiên cứu 10 năm tiếp theo được định hình như thế nào? Lộ trình hướng tới việc kết hợp công nghệ giải trình tự gen thế hệ mới (NGS) trên tế bào sinh thiết phôi nang với hệ thống Time-lapse tích hợp thuật toán học sâu (Deep Learning), nhằm thiết lập mô hình đa biến dự đoán chính xác xác suất trẻ sinh sống khỏe mạnh từ giai đoạn noãn non cho từng kiểu hình HCBTĐN riêng biệt.
Kết luận
- Luận án đã làm sáng tỏ đặc điểm dịch tễ học lâm sàng của HCBTĐN tại Việt Nam với sự chiếm ưu thế vượt trội của Kiểu hình D ($65{,}8%$) và Kiểu hình A ($20{,}7%$).
- Chứng minh hiệu lực vượt trội của GnRH đồng vận (Triptorelin 0,2 mg) trong việc tạo đỉnh LH nội sinh, giúp thu hồi tỷ lệ noãn MII trưởng thành đạt mức cao ($82{,}4% - 85{,}1%$) đồng nhất trên mọi kiểu hình.
- Xác lập tỷ lệ phôi ngày 3 đạt chất lượng tốt chiếm $61{,}4%$ theo tiêu chuẩn Đồng thuận Quốc tế Alpha 2011, với tỷ lệ phân mảnh bào tương thấp (< 10% chiếm $68{,}5%$) và tỷ lệ phôi bào bất thường đa nhân được hạn chế tối đa.
- Đạt được kết quả điều trị vô sinh xuất sắc trong chu kỳ chuyển phôi trữ đông với tỷ lệ $\beta\text{hCG}$ dương tính $63{,}2%$, tỷ lệ có thai lâm sàng $54{,}7%$, tỷ lệ làm tổ $34{,}8%$ và tỷ lệ thai tiến triển $48{,}3%$.
- Triệt tiêu hoàn toàn biến chứng quá kích buồng trứng nặng ($0{,}0%$), hiện thực hóa mô hình điều trị vô sinh an toàn tuyệt đối cho nhóm bệnh nhân có nguy cơ cao nhất trong chuyên ngành hỗ trợ sinh sản.
- Mở ra các hướng nghiên cứu liên ngành chuyên sâu giữa nội tiết sinh sản, phôi học tế bào và di truyền học phân tử, đóng góp nền tảng học thuật vững chắc cho sự phát triển của nền Y học Sinh sản Việt Nam hội nhập quốc tế.
Trích đoạn nội dung luận án
Tải xuống để đọc toàn bộBỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y ĐOÀN XUÂN KIÊN NGHIÊN CỨU HÌNH THÁI PHÔI VÀ KẾT QUẢ THỤ TINH ỐNG NGHIỆM Ở BỆNH NHÂN HỘI CHỨNG BUỒNG TRỨNG ĐA NANG ĐƢỢC TRƢỞNG THÀNH NOÃN BẰNG GnRH ĐỒNG VẬN LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI – 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y ĐOÀN XUÂN KIÊN NGHIÊN CỨU HÌNH THÁI PHÔI VÀ KẾT QUẢ THỤ TINH ỐNG NGHIỆM Ở BỆNH NHÂN HỘI CHỨNG BUỒNG TRỨNG ĐA NANG ĐƢỢC TRƢỞNG THÀNH NOÃN BẰNG GnRH ĐỒNG VẬN Chuyên ngành: Khoa học y sinh Mã số: 972 0101 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Cán bộ hƣớng dẫn: 1. Nguyễn Thanh Tùng 2. Đoàn Thị Hằng HÀ NỘI – 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết quả trong luận án là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất cứ công trình nghiên cứu nào khác.
TÁC GIẢ LUẬN ÁN Đoàn Xuân Kiên LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám đốc Học viện Quân Y, Phòng sau đại học, Viện Mô Phôi lâm sàng quân đội – Học viện Quân Y, Sở Y tế tỉnh Phú Thọ, Bệnh viện đa khoa tỉnh Phú Thọ, Bệnh viện Sản Nhi tỉnh Phú Thọ đã cho phép và tạo điều kiện cho tôi thực hiện thành công luận án này. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS. Quản Hoàng Lâm, PGS. Trịnh Thế Sơn, GS.
Nguyễn Đình Tảo, TS. Nguyễn Thanh Tùng và TS. Đoàn Thị Hằng những ngƣời thầy trực tiếp, tận tâm hết lòng hƣớng dẫn, tạo điều kiện giúp đỡ và cho tôi những kinh nghiệm trong suốt thời gian nghiên cứu và hoàn thành luận án. Tôi xin trân trọng cảm ơn các nhà khoa học đã đóng góp những ý kiến quý báu để tôi hoàn thiện luận án này.
Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn đến: Tập thể cán bộ, nhân viên Viện Mô phôi lâm sàng quân đội – Học viện Quân Y đã tạo điều kiện giúp đỡ tôi trong quá trình học tập, thu thập số liệu và hoàn thành luận án. Cuối cùng, tôi xin cảm ơn gia đình, những ngƣời thân và bạn bè, cán bộ Trung tâm Hỗ trợ sinh sản và Nam học – Bệnh viện Sản Nhi Phú Thọ đã động viên, hỗ trợ tôi về mọi mặt trong cuộc sống, học tập và nghiên cứu. Hà Nội, ngày 22 tháng 02 năm 2021 TÁC GIẢ LUẬN ÁN Đoàn Xuân Kiên MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục các chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình Danh mục biểu đồ ĐẶT VẤN ĐỀ …………………………………. TỔNG QUAN TÀI LIỆU …………………………………… 3 1.
Sự phát triển và trƣởng thành noãn…………………………………. Sự hình thành và phát triển của nang noãn ……………………. Gây trƣởng thành noãn trong thụ tinh trong ống nghiệm ………. Đánh giá độ trƣởng thành của noãn …………………………….
Hội chứng buồng trứng đa nang ……………………………………. Lịch sử phát hiện và tiêu chuẩn chẩn đoán ……………………. Tỉ lệ lƣu hành …………………………………………………. Sự phân bố kiểu hình ………………………………………….
Điều trị hiếm muộn cho nhóm bệnh nhân mong muốn có thai … 17 1. Đánh giá hình thái phôi nuôi cấy trong ống nghiệm ………………. Các nghiên cứu hình thái phôi nuôi cấy giai đoạn phôi phân chia20 1. Đồng thuận về đánh giá phân loại phôi ……………………….
Những nghiên cứu về GnRH đồng vận gây trƣởng thành noãn và phác đồ GnRH đối vận …………………………………………………. Những nghiên cứu về GnRH đồng vận gây trƣởng thành noãn. Nghiên cứu về phác đồ GnRH đối vận trên bệnh nhân hội chứng buồng trứng đa nang …………………………………………………. ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ……….
Đối tƣợng nghiên cứu ………………………………………………. Địa điểm nghiên cứu …………………………………………… 39 2. Thời gian nghiên cứu …………………………………………. Phƣơng pháp nghiên cứu ………………………………………….
Thiết kế nghiên cứu …………………………………………. Cỡ mẫu và chọn mẫu …………………………………………. Các chỉ tiêu nghiên cứu ………………………………………… 40 2. Quy trình nghiên cứu ………………………………………….
Xử lý số liệu ………………………………………………………… 56 2. Xử lý số liệu ……………………………………………………. Các biện pháp khống chế sai số ………………………………. Vấn đề đạo đức trong nghiên cứu ………………………………….
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU …………………………………. Đặc điểm chung của đối tƣợng nghiên cứu và tỉ lệ phân bố kiểu hình 58 3. Đặc điểm chung của đối tƣợng nghiên cứu ……………………. Phân bố theo kiểu hình của bệnh nhân hội chứng buồng trứng đa nang ……………………………………………………………….
Đánh giá đặc điểm hình thái và phân loại noãn, phôi ………………. Đánh giá đặc điểm về hình thái và phân loại noãn ……………. Đặc điểm hình thái và phân loại phôi nuôi cấy ngày 3 ………… 65 3. Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kết quả điều trị vô sinh ……… 72 3.
Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng của đối tƣợng nghiên cứu …. Kết quả điều trị vô sinh ………………………………………… 77 CHƢƠNG 4. Đặc điểm chung của đối tƣợng nghiên cứu ………………………… 89 4. Bàn về đối tƣợng, phƣơng pháp nghiên cứu, cách thu thập và đánh giá noãn, phôi …………………………………………………… 89 4.
Đặc điểm chung của đối tƣợng nghiên cứu ……………………. Phân loại kiểu hình ……………………………………………. Đặc điểm hình thái và phân loại noãn, phôi ………………………. Đặc điểm hình thái và phân loại noãn ………………………….
Đặc điểm hình thái và phân loại phôi nuôi cấy ngày 3 ………… 96 4. Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kết quả điều trị vô sinh theo phân nhóm kiểu hình của bệnh nhân hội chứng buồng trứng đa nang … 104 4. Các đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng của đối tƣợng nghiên cứu104 4. Kết quả điều trị vô sinh ……………………………………….
122 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ ……………………… 123 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI LUẬN ÁN …………………… 123 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH SÁCH BỆNH NHÂN NGHIÊN CỨU BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT TT Phần viết tắt Phần viết đầy đủ 1 AE – PCOS Androgen Excess & Polycystic Ovary Syndrome 2 AFC Antral Follicle Count (Số nang thứ cấp) 3 AMH Anti – Müllerian Hormone 4 ASRM American Society for Reproductive Medicine (Hiệp hội Y học sinh sản Hoa Kỳ) 5 BMI Body Mass Index (Chỉ số khối cơ thể) 6 CC Clomiphen citrate 7 E2 Estradiol 8 ESHRE European Society for Human Reproduction and Embryology (Hiệp hội Sinh sản và Phôi học Châu Âu) 9 FSH Follicle Stimulating Hormone (Hormon kích thích phát triển nang noãn) 10 GnRH Gonadotropin Releasing Hormone (Hormon giải phóng Gonadotropin) 11 GV Germinal Vesicle 12 HA Hyperandrogenism (Cường androgen) 13 HCBTĐN Hội chứng buồng trứng đa nang 14 hCG Human Chorionic Gonadotropin 15 hMG Human menopausal gonadotropin 16 ICSI Intracytoplasmic Sperm Injection (Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn) TT Phần viết tắt Phần viết đầy đủ 17 IGF Insulin – like Growth Factor 18 IVM In Vitro Maturation (Trưởng thành noãn non) 19 KTBT Kích thích buồng trứng 20 LH Luteinizing Hormone (Hormon hoàng thể hóa) 21 NIH National Institutes of Health (Viện Y tế quốc gia Hoa Kỳ) 22 mFG Modified Ferriman – Gallwey (Thang điểm Ferriman – Gallwey cải tiến) 23 MI Metaphase I 24 MII Metaphase II 25 MVBT Mảnh vỡ bào tƣơng 26 OD Ovulation Dysfunction (Rối loạn phóng noãn) 27 PCOM Polycystic Ovarian Morphology (Hình ảnh buồng trứng đa nang) 28 HCQKBT Hội chứng quá kích buồng trứng 29 SHBG Sex Hormone Binding Globulin 30 TTON Thụ tinh ống nghiệm DANH MỤC BẢNG Bảng Tên bảng Trang 1.1 Đồng thuận Alpha đánh giá phân loại phôi ngày 2 và 3 27 2.1 Phân loại hình thái phôi ngày 3 theo tiêu chuẩn đồng thuận 50 2.2 Phân loại hội chứng quá kích buồng trứng 54 3.1 Đặc điểm tuổi, khu vực sống của đối tƣợng nghiên cứu 58 3.2 Phân loại vô sinh, tiền sử 59 3.3 Phân bố theo số lƣợng noãn thu đƣợc 61 3.4 Phân loại số lƣợng noãn thu đƣợc trung bình theo nhóm kiểu hình 63 3.5 Tỉ lệ noãn MII thu đƣợc 65 3.6 Phân loại số lƣợng phôi ngày 3 tạo đƣợc theo kiểu hình hội chứng buồng trứng đa nang 66 3.7 Phân loại số lƣợng phôi bào theo kiểu hình của hội chứng buồng trứng đa nang 67 3.8 Đặc điểm sự đồng đều của các phôi bào 68 3.9 Độ phân mảnh bào tƣơng theo tỉ lệ 69 3.10 Phân loại phôi ngày 3 71 3.11 Phân bố các đặc điểm lâm sàng của đối tƣợng nghiên cứu 72 3.12 Nồng độ trung bình của nội tiết và AMH huyết tƣơng 73 3.13 Đánh giá hình ảnh buồng trứng qua siêu âm 74 3.14 Các đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng theo phân loại kiểu hình 76 3.15 Thời gian kích thích buồng trứng 77 3.16 Phân loại liều FSH đầu sử dụng kích thích buồng trứng 78 3.17 Tổng liều FSH theo kiểu hình 79 3.18 Độ dày niêm mạc tử cung 80 Bảng Tên bảng Trang 3.19 Đặc điểm hình thái niêm mạc tử cung 81 3.20 Số nang noãn theo kích thƣớc ngày trigger 82 3.21 Nồng độ estrogen trong máu trung bình ngày trigger 82 3.22 Phân loại số phôi chuyển và phôi trữ theo kiểu hình hội chứng buồng trứng đa nang 83 3.23 Tỉ lệ làm tổ phân theo nhóm kiểu hình hội chứng buồng trứng đa nang 85 3.24 Tỉ lệ có thai lâm sàng 86 3.25 Tỉ lệ có thai tiến triển 87 3.26 Tỉ lệ thai sinh hóa, chửa ngoài tử cung, thai lƣu, đa thai 87 3.27 Phân loại quá kích buồng trứng 88 4.1 Phân loại kiểu hình của các nghiên cứu 93 4.2 Số lƣợng noãn thu đƣợc ở phác đồ GnRH đối vận 95 4.3 Kết quả các nghiên cứu điều trị vô sinh trên nhóm bệnh nhân hội chứng buồng trứng đa nang 116 4.4 Kết quả thụ tinh ống nghiệm theo phân nhóm kiểu hình 117 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ Tên biểu đồ Trang 3.1 Phân bố tỉ lệ kiểu hình hội chứng buồng trứng đa nang 60 3.2 Phân loại số noãn thu đƣợc theo kiểu hình 64 3.3 Phân loại nồng độ AMH huyết tƣơng 75 3.4 Tỉ lệ số lƣợng phôi chuyển vào buồng tử cung 84 3.5 Tỉ lệ βhCG dƣơng tính sau chuyển phôi phân bố theo kiểu hình 85 DANH MỤC HÌNH Hình Tên hình Trang 1.1 Cấu trúc hCG và LH 6 1.2 Đỉnh LH khi dùng GnRH đồng vận gây trƣởng thành noãn 10 1.3 Đốt điểm buồng trứng đa nang 19 1.4 Mô tả tỉ lệ giữa các phôi bào đồng đều 23 1.5 Phân loại phôi phân chia bình thƣờng theo số lƣợng phôi 24 bào 2.1 Đánh giá rậm lông theo điểm Ferriman – Gallway cải tiến 42 2.2 Hình ảnh buồng trứng đa nang trên siêu âm 44 2.3 Cách đo thể tích buồng trứng 46 2.4 Phân loại noãn 48 2.5 Tiêu chuẩn đánh giá độ đồng đều của phôi bào 49 2.6 Phân loại phôi theo tỉ lệ mảnh vỡ bào tƣơng 50 2.1 Noãn GV của bệnh nhân nghiên cứu (x400) 62 3.2 Noãn MI của bệnh nhân nghiên cứu (x400) 62 3.3 Noãn MII của bệnh nhân nghiên cứu (x400) 63 3.4 Phôi ngày 3 có chất lƣợng tốt (x400) 70 3.5 Phôi ngày 3 có chất lƣợng trung bình (x400) 70 3.6 Phôi ngày 3 có chất lƣợng xấu (x400) 71 4.
Nội dung được bảo vệ bản quyền — Tải xuống đầy đủ
Trích dẫn luận án này
Đoàn Xuân Kiên (2021). Luận án tiến sĩ nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tin [Luận án tiến sĩ, Học viện Quân y]. LuanAn.net. https://luanan.net/tai-lieu-khac/luan-an-tien-si-nghien-cuu-hinh-thai-phoi-va-ket-qua-thu-tinh-ong-nghiem-o-benh-nhan-hoi-chung-buong-trung-da-nang
Câu hỏi thường gặp
Luận án "Luận án tiến sĩ nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tin" nghiên cứu về vấn đề gì?
Luận án: Luận án tiến sĩ nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tinh ống nghiệm ở bệnh nhân hội chứng buồng trứng đa nang. Xem tóm tắt và tải về tại LuanAn.ne
Luận án "Luận án tiến sĩ nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tin" được bảo vệ tại trường nào?
Luận án này được bảo vệ tại Học viện Quân y. Năm bảo vệ: 2021.
Luận án "Luận án tiến sĩ nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tin" thuộc chuyên ngành gì?
Luận án "Luận án tiến sĩ nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tin" thuộc chuyên ngành Khoa học y sinh. Danh mục: Tài liệu khác.
Luận án "Luận án tiến sĩ nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tin" có bao nhiêu trang?
Luận án "Luận án tiến sĩ nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tin" có 167 trang. Bạn có thể xem trước một phần tài liệu ngay trên trang web trước khi tải về.
Cách tải luận án "Luận án tiến sĩ nghiên cứu hình thái phôi và kết quả thụ tin" về máy như thế nào?
Để tải luận án về máy, bạn nhấn nút "Tải xuống ngay" trên trang này, sau đó hoàn tất thanh toán phí lưu trữ. File sẽ được tải xuống ngay sau khi thanh toán thành công. Hỗ trợ qua Zalo: 0559 297 239.