Luận án tiến sĩ: Hoạt tính kháng viêm và chống oxy hóa của Cordyceps spp Việt Nam
Luận án tiến sĩ nghiên cứu hoạt tính kháng viêm và chống oxy hóa của cao chiết nấm Cordyceps spp tại Việt Nam. Đánh giá hiệu quả sinh học trên bốn chủng nấm.
Hóa Sinh Học
Luan An
Luận án tiến sĩ
Năm xuất bản
Số trang
174
Thời gian đọc
27 phút
Lượt xem
2
Lượt tải
0
Phí lưu trữ
50 Point
Mục lục chi tiết
Tóm tắt nội dung
I. Cordyceps Việt Nam Nguồn Hoạt Chất Quý Giá
Đông trùng hạ thảo (Cordyceps spp.) là loại nấm dược liệu quý hiếm. Việt Nam sở hữu nhiều chủng Cordyceps có giá trị cao. Nghiên cứu tập trung vào bốn chủng nấm phân lập tại Việt Nam. Các chủng này bao gồm Cordyceps neovolkiana, Cordyceps taikomontana và Isaria cicadae. Mỗi loại chứa hàm lượng hoạt chất sinh học khác nhau. Cordycepin, polysaccharide và adenosine là các hợp chất chính. Phương pháp chiết xuất ảnh hưởng trực tiếp đến chất lượng sản phẩm. Chiết xuất bằng ethanol cho hiệu quả tối ưu. Cao toàn phần và cao phân đoạn được thu nhận từ sinh khối. Quả thể nấm cũng là nguồn nguyên liệu quan trọng. Các hoạt chất này có tiềm năng ứng dụng trong y dược.
1.1. Đặc Điểm Phân Bố Cordyceps Tại Việt Nam
Cordyceps spp. phân bố rộng khắp các vùng núi cao Việt Nam. Môi trường ẩm ướt và mát mẻ thuận lợi cho sinh trưởng. Cordyceps militaris và Cordyceps sinensis là hai loài phổ biến. Các chủng bản địa thích nghi tốt với khí hậu nhiệt đới. Nhiệt độ từ 15-25°C là điều kiện lý tưởng. Độ ẩm cao trên 80% giúp nấm phát triển. Nấm ký sinh trên sâu bọ hoặc nhộng côn trùng. Chu kỳ sinh trưởng kéo dài 3-6 tháng. Việc nuôi trồng nhân tạo đang được mở rộng. Công nghệ sinh học giúp tăng năng suất thu hoạch.
1.2. Phương Pháp Chiết Xuất Hoạt Chất Hiện Đại
Chiết xuất bằng nước là phương pháp truyền thống. Ethanol 70-95% cho hiệu suất cao hơn. Chiết ngâm kiệt đảm bảo thu hồi tối đa hoạt chất. Ethyl acetate phân lập các hợp chất ưa béo. CO2 siêu tới hạn bảo toàn cấu trúc phân tử. Nhiệt độ chiết ảnh hưởng đến chất lượng sản phẩm. Thời gian ngâm chiết từ 24-72 giờ. Tỷ lệ nguyên liệu/dung môi là 1:10 đến 1:20. Sắc ký cột hở giúp tinh chế hoạt chất. Phương pháp kết hợp tăng hiệu quả chiết xuất.
1.3. Thành Phần Hóa Học Chính Của Cordyceps
Cordycepin (3'-deoxyadenosine) là hoạt chất đặc trưng. Polysaccharide chiếm 3-8% trọng lượng khô. Adenosine và các nucleoside khác có hàm lượng cao. Flavonoid và phenolic là nhóm chất chống oxy hóa mạnh. Protein và amino acid chiếm 20-30%. Các nguyên tố vi lượng như Se, Zn, Fe. Ergosterol và các sterol khác có giá trị dược lý. Mannitol và trehalose là đường chính. Acid béo không bão hòa có lợi cho sức khỏe. Hàm lượng hoạt chất phụ thuộc vào loài và điều kiện nuôi trồng.
II. Hoạt Tính Chống Oxy Hóa Của Cordyceps Spp
Chất chống oxy hóa trong đông trùng hạ thảo rất đa dạng. Khả năng khử gốc tự do DPPH đạt hiệu quả cao. Hoạt tính bắt gốc ABTS+ cũng được chứng minh. Cao chiết ethanol có năng lực khử mạnh nhất. Polysaccharide đóng vai trò quan trọng trong chống oxy hóa. Flavonoid và phenolic tăng cường hiệu quả bảo vệ tế bào. Enzyme xanthine oxidase bị ức chế bởi các cao chiết. Cordyceps neovolkiana cho kết quả vượt trội. Nồng độ IC50 thấp chứng tỏ hoạt tính mạnh. Các thử nghiệm in vitro xác nhận tiềm năng ứng dụng. Hoạt tính chống oxy hóa giúp ngăn ngừa lão hóa tế bào.
2.1. Phương Pháp Đánh Giá Năng Lực Khử
Phương pháp FRAP đo năng lực khử ion sắt. Cao chiết được pha loãng ở nhiều nồng độ khác nhau. Phản ứng diễn ra trong 30 phút ở nhiệt độ phòng. Đo độ hấp thụ tại bước sóng 593 nm. Vitamin C làm chất chuẩn dương. Kết quả tính theo đương lượng Trolox. Cao phân đoạn ethyl acetate cho giá trị cao nhất. Polysaccharide cũng có năng lực khử đáng kể. Mối tương quan tuyến tính giữa nồng độ và hoạt tính. Phương pháp đơn giản, nhanh chóng và chính xác.
2.2. Khả Năng Bắt Gốc Tự Do DPPH
DPPH là gốc tự do ổn định màu tím đậm. Chất chống oxy hóa khử DPPH thành màu vàng nhạt. Phản ứng xảy ra trong 30 phút ở tối. Đo độ hấp thụ tại 517 nm bằng quang phổ kế. Tính phần trăm ức chế theo công thức chuẩn. IC50 của cao Cordyceps neovolkiana đạt 45-78 μg/mL. Quercetin làm chất đối chứng dương. Cao ethanol hiệu quả hơn cao nước. Flavonoid và phenolic là thành phần hoạt động chính. Kết quả phù hợp với các nghiên cứu quốc tế.
2.3. Ức Chế Enzyme Xanthine Oxidase
Xanthine oxidase tạo acid uric và gốc superoxide. Ức chế enzyme này giảm stress oxy hóa. Cao chiết Cordyceps làm giảm hoạt độ enzyme. Phản ứng đo ở 295 nm theo phương pháp quang phổ. Allopurinol là chất ức chế chuẩn. IC50 của cao phân đoạn đạt 28-65 μg/mL. Cordycepin và adenosine có vai trò ức chế mạnh. Cơ chế ức chế có tính cạnh tranh. Ứng dụng trong điều trị gút và bệnh thận. Hoạt tính này hỗ trợ chống viêm hiệu quả.
III. Hoạt Tính Kháng Viêm Của Cao Chiết Cordyceps
Viêm nhiễm là phản ứng miễn dịch tự nhiên của cơ thể. Viêm mạn tính gây nhiều bệnh lý nguy hiểm. Cordyceps militaris có tác dụng chống viêm mạnh. Các cao chiết ức chế sản xuất cytokine viêm. Protein biến tính là dấu hiệu của phản ứng viêm. Cordyceps ngăn chặn quá trình này hiệu quả. Thử nghiệm trên tế bào RAW 264.7 cho kết quả tích cực. Nồng độ sử dụng an toàn với tế bào. Cơ chế tác động qua con đường NF-κB. Western blot xác nhận ức chế protein viêm. Tiềm năng phát triển thuốc chống viêm tự nhiên rất lớn.
3.1. Cơ Chế Ức Chế Biến Tính Protein
Biến tính protein xảy ra khi cấu trúc bị phá hủy. Nhiệt độ cao làm protein mất cấu trúc bậc ba. Albumin được dùng làm mô hình thử nghiệm. Cao chiết Cordyceps bảo vệ protein khỏi biến tính. Phần trăm ức chế đạt 45-82% ở nồng độ 200 μg/mL. Aspirin là chất đối chứng dương. Polysaccharide tạo màng bảo vệ quanh protein. Chất chống oxy hóa ngăn stress nhiệt. Kết quả đo bằng phương pháp quang phổ UV. Ứng dụng trong điều trị viêm khớp và viêm da.
3.2. Thử Nghiệm Trên Tế Bào RAW 264.7
RAW 264.7 là dòng tế bào đại thực bào chuột. Tế bào được kích thích viêm bằng LPS. Cao chiết Cordyceps neovolkiana được bổ sung trước LPS. Nồng độ thử nghiệm từ 10-200 μg/mL. Đo độc tính bằng phương pháp MTT assay. Tế bào sống sót trên 85% ở mọi nồng độ. Sản xuất NO (nitric oxide) giảm đáng kể. TNF-α và IL-6 cũng bị ức chế. Cordycepin là hoạt chất chính gây hiệu ứng. Không có độc tính tế bào ở nồng độ điều trị.
3.3. Phân Tích Western Blot Protein Viêm
Western blot xác định biểu hiện protein đích. iNOS và COX-2 là marker viêm quan trọng. Cao chiết giảm biểu hiện cả hai protein. Điện di SDS-PAGE phân tách protein theo khối lượng. Chuyển protein lên màng PVDF bằng điện. Kháng thể đặc hiệu gắn với protein đích. Phát hiện bằng hóa phát quang ECL. Định lượng băng protein bằng phần mềm ImageJ. Biểu hiện iNOS giảm 60-75% so với đối chứng. COX-2 giảm 55-68% khi có cao chiết. Kết quả khẳng định cơ chế kháng viêm phân tử.
IV. Phân Lập Và Xác Định Cấu Trúc Hoạt Chất
Sắc ký cột hở là phương pháp phân lập chính. Silica gel làm pha tĩnh cho hiệu quả tốt. Hệ dung môi gradient tăng dần độ phân cực. Cao phân đoạn được nạp lên cột sắc ký. Thu các phân đoạn nhỏ theo thể tích cố định. TLC giám sát quá trình phân lập. Các phân đoạn tương tự được gộp lại. Tinh chế thêm bằng sắc ký cột lần hai. Kết tinh hoặc làm khô thu hoạt chất tinh khiết. Phổ NMR xác định cấu trúc phân tử chính xác. Cordycepin và adenosine được phân lập thành công.
4.1. Quy Trình Sắc Ký Cột Phân Lập
Cột sắc ký đường kính 3-5 cm, chiều cao 40-60 cm. Silica gel 60 (63-200 μm) làm chất hấp phụ. Tỷ lệ mẫu/silica là 1:50 đến 1:100. Hệ dung môi bắt đầu từ hexane/ethyl acetate. Tăng dần độ phân cực đến methanol 100%. Tốc độ chảy 2-3 mL/phút đảm bảo tách tốt. Thu phân đoạn mỗi 50-100 mL. Kiểm tra bằng TLC dưới đèn UV 254 nm và 365 nm. Phun thuốc thử vanillin-H2SO4 phát hiện hợp chất. Các phân đoạn hoạt tính được tinh chế tiếp.
4.2. Phân Tích Phổ Cộng Hưởng Từ Hạt Nhân
NMR là phương pháp xác định cấu trúc hiện đại. 1H-NMR cho thông tin về proton trong phân tử. 13C-NMR xác định khung carbon của hợp chất. Mẫu hòa tan trong DMSO-d6 hoặc CD3OD. Máy Bruker 500 MHz đo phổ với độ phân giải cao. Dịch chuyển hóa học tính theo TMS. Phổ DEPT phân biệt CH3, CH2, CH và C bậc bốn. Phổ 2D (COSY, HSQC, HMBC) xác định liên kết. So sánh với thư viện phổ chuẩn. Cordycepin được xác nhận qua tín hiệu đặc trưng ở δ 6.2-8.2 ppm.
4.3. Thu Nhận Và Bảo Quản Hoạt Chất Tinh Khiết
Hoạt chất tinh khiết được kết tinh từ dung môi thích hợp. Methanol/nước là hệ dung môi kết tinh tốt. Làm lạnh từ từ ở 4°C trong 24-48 giờ. Lọc kết tinh qua phễu Buchner. Rửa bằng dung môi lạnh để loại tạp chất. Sấy khô trong tủ hút chân không. Độ tinh khiết kiểm tra bằng HPLC đạt >95%. Bảo quản trong lọ thủy tinh kín, tránh ánh sáng. Nhiệt độ -20°C giữ hoạt tính lâu dài. Ghi nhận khối lượng, độ tinh khiết và ngày thu nhận.
V. Đánh Giá Độc Tính Và An Toàn Sinh Học
Độc tính tế bào là tiêu chí quan trọng trước ứng dụng. MTT assay đánh giá khả năng sống của tế bào. Tế bào RAW 264.7 được nuôi cấy chuẩn. Cao chiết và hoạt chất được thử ở nhiều nồng độ. Thời gian ủ 24-72 giờ theo quy trình. Đo mật độ quang ở 570 nm bằng microplate reader. Tính phần trăm tế bào sống so với đối chứng. Nồng độ không gây độc (NOEL) được xác định. Cordyceps neovolkiana an toàn đến 200 μg/mL. Kết quả cho thấy tiềm năng ứng dụng lâm sàng cao.
5.1. Phương Pháp MTT Assay Chuẩn
MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) là thuốc thử màu vàng. Tế bào sống chuyển MTT thành formazan màu tím. Mật độ tế bào 1×10⁴ cells/well trong đĩa 96 giếng. Ủ tế bào với mẫu thử trong 24 giờ. Thêm 10 μL MTT 5 mg/mL vào mỗi giếng. Ủ tiếp 4 giờ ở 37°C, 5% CO2. Hút bỏ môi trường, thêm 100 μL DMSO hòa tan formazan. Lắc nhẹ 10 phút để hòa tan hoàn toàn. Đo OD570 nm trên máy đọc đĩa. Tính % sống: (OD mẫu/OD đối chứng) × 100.
5.2. Xác Định Nồng Độ An Toàn Sử Dụng
Nồng độ thử nghiệm từ 10-500 μg/mL. Vẽ đồ thị liều-đáp ứng (dose-response curve). IC50 (nồng độ gây chết 50% tế bào) được tính toán. Cao chiết Cordyceps neovolkiana có IC50 >400 μg/mL. Nồng độ làm việc chọn 50-200 μg/mL. Tế bào sống >85% ở nồng độ này. NOEL (No Observed Effect Level) là 200 μg/mL. Chỉ số chọn lọc (SI) = IC50/EC50 >2 là an toàn. Không quan sát thay đổi hình thái tế bào. Kết quả tương đương với Cordyceps sinensis chuẩn.
5.3. Đánh Giá Hình Thái Tế Bào
Quan sát tế bào dưới kính hiển vi đảo ngược. Tế bào khỏe mạnh có hình dạng tròn, bám tốt. Nhân to, rõ ràng và màng tế bào nguyên vẹn. Tế bào chết có hình dạng co rút, tách khỏi đáy. Nhuộm trypan blue phân biệt tế bào sống/chết. Tế bào sống không nhận màu xanh. Tế bào chết màu xanh đậm do màng thủng. Đếm tế bào bằng hemocytometer. Tỷ lệ tế bào sống >90% ở nồng độ điều trị. Không có dấu hiệu apoptosis hay necrosis.
VI. Ứng Dụng Và Triển Vọng Phát Triển Sản Phẩm
Cordyceps Việt Nam có tiềm năng thương mại lớn. Thị trường thực phẩm chức năng đang phát triển mạnh. Sản phẩm từ đông trùng hạ thảo bản địa cạnh tranh được với nhập khẩu. Công nghệ chiết xuất hiện đại nâng cao giá trị. Tiêu chuẩn hóa hoạt chất đảm bảo chất lượng ổn định. Cordycepin và polysaccharide là marker chất lượng. Dạng viên nang, bột và cao lỏng dễ sử dụng. Kết hợp với dược liệu khác tăng hiệu quả. Nghiên cứu lâm sàng cần được tiến hành. Bảo vệ nguồn gen nấm bản địa là ưu tiên. Phát triển bền vững gắn với bảo tồn đa dạng sinh học.
6.1. Phát Triển Sản Phẩm Thực Phẩm Chức Năng
Viên nang cordycepin chuẩn hóa 1-3%. Bột cao khô đóng gói tiện lợi. Cao lỏng kết hợp mật ong tăng hấp thu. Sản phẩm hỗ trợ miễn dịch cho người cao tuổi. Công thức chống mệt mỏi cho vận động viên. Sản phẩm hỗ trợ gan, thận từ polysaccharide. Đăng ký công bố sản phẩm theo quy định. Nghiên cứu độ ổn định trong bảo quản. Thời hạn sử dụng 24-36 tháng. Bao bì chống ẩm, chống ánh sáng. Marketing nhấn mạnh nguồn gốc thiên nhiên Việt Nam.
6.2. Hướng Nghiên Cứu Mở Rộng
Thử nghiệm lâm sàng giai đoạn I, II. Nghiên cứu dược động học và dược lực học. Phát triển dạng bào chế nano tăng sinh khả dụng. Kết hợp với hóa trị liệu điều trị ung thư. Nghiên cứu tác động lên vi sinh vật đường ruột. Ứng dụng trong mỹ phẩm chống lão hóa. Sản xuất enzyme xanthine oxidase inhibitor. Phát triển marker DNA xác thực nguồn gốc. Nuôi trồng quy mô công nghiệp. Tối ưu hóa điều kiện lên men sinh khối.
6.3. Bảo Tồn Và Phát Triển Bền Vững
Xây dựng ngân hàng gen Cordyceps Việt Nam. Bảo tồn in situ tại các vườn quốc gia. Bảo tồn ex situ bằng nuôi cấy mô. Quy hoạch vùng nuôi trồng tập trung. Chuyển giao công nghệ cho nông dân vùng cao. Chứng nhận VietGAP, organic cho sản phẩm. Liên kết chuỗi giá trị từ nông trại đến người tiêu dùng. Đào tạo nguồn nhân lực chuyên môn cao. Hợp tác quốc tế trong nghiên cứu và phát triển. Xây dựng thương hiệu Cordyceps Việt Nam trên thị trường quốc tế.
Tải xuống file đầy đủ để xem toàn bộ nội dung
Tải đầy đủ (174 trang)Trích đoạn nội dung luận án
Tải xuống để đọc toàn bộLAM KHAC KỶ NGHIEN CUU HOAT TINH KHANG VIEM VA CHONG OXY HOA CUA CAO CHIET TU BON CHUNG NAM Cordyceps spp. PHAN LAP TAI VIET NAM LUAN AN TIEN SI HOA SINH HOC TP. Hồ Chi Minh - Năm 2023 ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP. HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH KHÁNG VIÊM VÀ CHÓNG OXY HÓA CUA CAO CHIET TỪ BÓN CHUNG NAM Cordyceps spp.
PHAN LAP TAI VIET NAM Nganh: HOA SINH HOC Mã số ngành: 62 42 01 16 Phản biện 1: PGS. Nguyễn Thị Thu Hương Phản biện 2: PGS. Nguyễn Quang Vinh Phản biện 3: TS. Hồ Bảo Thùy Quyên Phản biện độc lập 1: PGS.
N guyễn Quang Vinh Phản biện độc lập 2: TS. Nguyễn Hoàng Dũng NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: 1. Ngô Đại Hùng 2. Định Minh Hiệp TP.
Hồ Chí Minh - Năm 2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan luận án tiễn sĩ ngành Hóa sinh học với đề tài “Nghiên cứu hoạt tính kháng viêm và chống oxy hóa của cao chiết từ bốn chủng nam Cordyceps spp. phân lập tại Việt Nam” là công trình khoa học do Tôi thực hiện. Những kết quả nghiên cứu của luận án hoàn toàn trung thực, chính xác và không trùng lap với các công trình đã công bô trong vả ngoải nước. Nghiên cứu sinh Lâm Khắc Kỷ 1H LỜI CÁM ƠN Tôi xin chân thành gửi lời cảm ơn đến: Ban giám hiệu và tập thể cán bộ công nhân viên, các phòng ban chức năng và tập thể giảng viên bộ môn Sinh hóa thuộc Khoa Sinh học- Công nghệ sinh học của trường Đại học Khoa học tự nhiên, trực thuộc Đại học Quốc gia TPHCM đã chấp thuận và tạo điều kiện cho tôi được tham gia học tập cũng nhw nghiên cứu tại trường.
Ban giám hiệu và tập thể cán bộ công nhân viên, các phòng ban chức năng và tập thể giảng viên thuộc Viện Công nghệ Sinh học và thực phẩm của trường Đại học Công nghiệp TPHCM đã hỗ trợ cho tôi được tham gia học tập và hoàn thành chương trình nghiên cứu sinh. Các thành viên trong nhóm Cordyceps và toàn thé đồng nghiệp, các cơ quan xi nghiệp, các nhà nghiên cứu có liên quan cũng như bạn bè thân quyến đã tận tâm giúp đỡ tôi hoàn thành luận án. Cuối cùng xin gửi lời cảm ơn chân thành nhất đến Cha Mẹ và gia đình tiếp thêm động lực và quyết tâm cho con để hoàn thành tốt luận án này. Thành phố Hồ Chi Minh, năm 2023 IV MỤC LỤC LOT CÁM ƠN.
ng ng HH HH re iv DANH MỤC CÁC KY HIEU, CÁC CHU VIET TẮTT.-- 2s +SE+E+E+E£EE+EeEeEzkererx x DANH MỤC CAC BANG 2.csccessessssessseessneesseessveesneessueesuecsueessessneesnecesneesnessneesneeeses xiv DANH MỤC CAC HINH 00. cececccscsesescscecscscscsvecsvsecscscecevacevevsvevsvevsesecacecavavavevevsvavsvseseees Xv MỞ DAU _. ch HH HH hưng xviii CHƯƠNG 1: TONG QUAN Wu. Giới thiệu chung VỀ CordyCeps.
Tinh hình phân bố và đặc điểm sinh trưởng của Cordyceps. Cách sử dụng Cordyceps như nguồn dược liệu theo truyền thống. Các phương pháp chiết xuất hoạt chất ter nam Cordycep. Chiết xuất hoạt chất từ nắm Cordyceps băng nước.
Chiết xuất hoạt chất từ nắm Cordyceps băng côn. Chiết xuất hoạt chất từ nam Cordyceps bang ethyl acetate. Chiết xuất hoạt chất từ nắm Cordyceps bằng CO2 siêu tới hạn. Các hoạt chất thu nhận từ COFdÏÿC€JD.
Các phương pháp phân lập hoạt chất từ nắm Cordycepss. Các thành phần hóa học của Cordÿ€j§.----- - + cs+s+cscsce+escecsei 8 1. Hoạt tính sinh học của các chiết xuất từ Cordyceps Spp. Tac dụng dược lý của Cordyceps Spp.ĂẶ Sàn HS si, 16 1.
Kha năng chống oxy hóa.-:- ¿©2522 ‡E£EE2EEEE2EEEEEEerkerrrerees 17 1. Tác dụng chống viêm.---¿- 2 ¿St +x+EE+EE2EE2E£EeEEerkerkerrrrrree 18 1. Khả năng điều hoa miễn dich của Cordyceps Sp. Tac dụng kháng virus của Cordyceps SD.
Tac dụng kháng khối u.---2- 2s +E+EE+E#EE+ESEEEEEEEEErrkrrrrerees 21 1. Tác dụng hạ đường huyẾt. ¿+ St EEE2EEEEEEEEEEEErErrerrrees 22 1. _ Tác dụng hạ cholesterol huyết và huyết áp.
Tác dụng chống mệt mỏi và chống trầm cảm. Tác dụng tăng cường sinh Ìý. Tác dụng bảo vệ thận và Øan. Khả năng chống lão hóa.---- 2 +52+E+EE+E+EE2EeEEzEerkererrerees 26 1.
Giới thiệu về các đối tượng nắm dùng trong nghiên cứu. Nấm Cordyceps neovolkini4. Nắm Cordyceps takdOMontand. Nấm Isaria Cicddde .eccececcscessssessessssessssesssseesesesssssseesesesssesssesseseeseaees 32 CHƯƠNG 2: VAT LIEU VÀ PHƯƠNG PHAP.
Vật liệu và hóa Chat. Các chủng nam dùng trong nghiên cứu. Thu nhận cao chiết từ sinh khối và quả thể. Thu nhận cao toàn phần bằng phương pháp chiết ngắm kiệt với ethanol koyviaiiidiẳddddddỎỎẳỶÝồÕ.
Thu nhận cao phân đoạn. Thu nhận cao EPS.-- 2000001111111 10110111 nghe 38 “NH0 con. Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa của các cao chiết từ các chủng nam NHN CUU An. Khảo sát năng lực KAU.
Khảo sát hoạt tính bắt gốc tự do DPPH. Khảo sát hoạt tinh bắt gốc tự do ABTS+. Khảo sát khả năng ức chê enzyme xanthine oxidase của các cao chiét từ nắm 45 2. Khảo sát khả năng ức chê biên tính protein của cao chiết từ các chung nam TGNISN CUU 0101.
Tách hoạt chất từ cao phân đoạn.-- 1n S ng ng ve 47 "hs. Sắc ký cột hở. Xác định cau trúc của hoạt chất thu được bằng phương pháp cộng hưởng từ hạt nhân (TH-NMR, !3C-NMR).- - - :Sc tt S211 1212111 1111111011111 11111 tk. Khảo sát hoạt tính gây độc của các hoạt chất thu được từ nam C.
neovolkiana trên tế bào RAW 264. Phân tích Western DÌO(. - - - -- - -- - c c3 00000311 vn nh cv kg 52 2. Khảo sát khả năng ức chế sinh tổng hợp nitric oxide trên tế bào RAW 264.7 của cao ethyl acetate và các hoạt chất.
Xác định anh hưởng cua cao ethyl] acetate và các hoạt chất thu được lên SU OXY hoá trÊT DTOf€IT.-- -- - c 5 1322111111131 111 19 1111 ng ng ng re 55 2. Khao sát kha năng bảo vệ DNA tế bào của cao ethyl acetate và các hoạt Chất. Phương pháp xử lí số liệu.-¿- 5 2E +E£EE+E+E£EEEE+EEEEEEEEeEerkrkrreree 57 CHƯƠNG 3: KET QUA VA BIEN LUAN. Hiệu suât chiết xuat cao toàn phân và cao phân đoạn từ sinh khôi va qua thé In.
Hiệu suất chiết cao toàn phần và cao phân đoạn từ sinh khối của 4 chủng nam nghiÊn CỨU. --- (<< EEE1010118883911 111139931111 99 vn re 59 3. Hiệu suât chiét cao toàn phan va các cao phân đoạn từ các mau quả thé của 3 chủng nắm nghiên cứu (không thu được quả thé nam J. Kết quả khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in vitro của các mẫu cao chiết.
Kết quả khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in vitro theo phương pháp xác định năng lực khử. Kết quả khảo sát kha năng bắt gốc tự do DPPH. Kết quả khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in vitro theo phương pháp khảo sát bắt gốc tự do AB'TS. Kết quả khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in vitro theo phương pháp ức chế enzyme xanthine oxidase (XÒ).
Kết quả khảo sát hoạt tính kháng viêm in vitro của các mẫu cao chiết theo phương pháp khảo sát hoạt tính ức chế biến tính bovine serum albumin bởi nhiệt 3. Kết quả khảo sát hoạt tính ức chế biến tính BSA bởi nhiệt độ của đicÏOfÍ€nAC. -- - - G0000 0000030100606 3105 1153501001301 S0 1 Su vu vu vs g 88 3. Kết quả khảo sát hoạt tính ức chế biến tính BSA bởi nhiệt độ của cao EtOH và cao phân đoạn từ sinh khối nam C.
neovolkiana DL0004 và C. Kết quả khảo sát hoạt tinh ức chế biến tinh BSA bởi nhiệt độ của cao EtOH và cao phân đoạn từ quả thé nam C. neovolkiana DL0004 và C. Kết quả phân tách chat từ cao phân đoạn EA của sinh khối nam C.
-- c1 111 v1 TH ngà 94 Viii 3. Kết quả khảo sát khả năng gây độc tế bào RAW 264.7 của các chất được phân tách từ cao phân đoạn EA của sinh khối nam C. Kết quả khảo sát khả năng ức chế sinh tổng hợp nitric oxide trên tế bào RAW 264.7 của các chất được phân tách từ cao phân đoạn EA từ sinh khối nắm C. neovolkiand DLOOOS di ằằ =.
Kết quả khảo sát ức chế p50 va p65 trên tín hiệu NF-kB của tế bao RAW 264.7 của các chất được phân tách từ cao phân đoạn EA từ sinh khối nam C. Kết quả khảo sát ức chế p50 va p65 trên tín hiệu NF-kB tế bao RAW 264.7 của cao EA từ sinh khối C. Kết quả khảo sát ức chế p50 trên tín hiệu NF-kB tế bào RAW 264.7 của các chất tách từ cao EA sinh khối C. Kết quả khảo sát ức chế p65 trên tín hiệu NF-kB tế bào RAW 264.7 của các chất tách từ cao EA từ sinh khối C.
Kết quả khảo sát khả năng chống oxy hóa protein màng của tế bào RAW 264.7 của các chất tách từ cao EA từ sinh khối C. Kết quả khảo sát khả năng bảo vệ DNA tế bào RAW 264.7 của các chất tách từ cao EA sinh khối C.---- + +s+e+E+e+ess££ss+z 107 CHUONG 4: KET LUẬN VÀ KIÊN NGHỊ,. 5 St EEEEEEESESkekeEekeEerererererxrx 111 DANH MỤC CÔNG TRINH TAC GIAJ.cssssssesssssessesssessessecsscsuessecseesessecsecseesneaseesess 113 TAI LIEU THAM 04. 114 1X DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIET TAT Kí hiệu Chữ viết đầy đủ Diễn giải tiếng Việt ABTS 2,2'-azino-bis(3- ethylbenzothiazoline-6- acid AMPK Adenosine 5 protein monophosphate protein kinase APC Antigen Presenting Cells Bcl-2 B-cell lymphoma-2.
BSA Bovine serum albumin C.xxx Cordyceps xxx CBG-CS-2 CS=Cordyceps. CBG-CS-2 là chủng Paecilomyces hepiali cua Cordyceps spp. CBP-1 CREB-binding protein Có anh hưởng lên stress tê bao. CLR C-type Lectin Receptors | Thụ thê lectin C-type Lectin Receptors COX-2 cyclooxygenase-2 CMP Common myeloid Tiền thân của tế bào tủy làm tăng các chỉ progenitor.
số tuyến ức va lá lách CS-F30 Một polysaccharides thu được từ sợi nam Cordyceps, giúp tăng cường hoạt động cua glucokinase c-jun va c-fos Cac proto-gen gay ung thu c-Jun va c- fos mã hóa các protein tạo thành một phức hợp điều chỉnh quá trình phiên mã từ các chất khởi động có chứa các yếu tố kích hoạt. CSEHH, Các phân đoạn chiết xuất: n-hexan/n- SEHM val hexan (CSEHH), phân đoạn n- CSEE hexan/MeOH-H20 (CSEHM), phân doan etyl acetate (CSEE). GSK3B Glycogen synthase kinase ba beta DMEM Dulbecco's Modified Eagle Medium DMSO Dimethyl sulfoxide DPPH 2,2-diphenyl-I- picrylhydrazyl EA Ethyl acetate EPS Exopolysaccharide ESI Electrospray ionization GPx Glutathione peroxidase GSH Reduced glutathione GSK3B Glycogen synthase kinase 3B HMBC Heteronuclear Multple Bond Correlation HMQC Heteronuclear Single- Quantum Coherence HPLC High-performance liquid chromatography JNK c-Jun N-terminal kinases IC Isaria cicadae ICso Inhibitor — concentration Nong độ ức chế 50% 50% : - IFN-y và IL-12,| Interferon-gamma vài Phân tử của hệ thông miễn dịch IL-IP Interleukin 12; Interleukin beta iNOS Inducible nitric oxide synthase IkBa nuclear factor of kappa light polypeptide’ gene enhancer in B-cells inhibitor, alpha IPS Intropolysaccharide IT Isaria tenuipes MDR/HIF-la | Multidrug resistance Kháng da thuốc/Hypoxia inducible factor-1 MCF-7, B16, Human breast cancer (MCF-7), Human HL-60 va cancer B16, leukemia (HL-60), Liver HepG2 cancer (HepG2). MDA Malondialdehyde MMP Metallopeptidase MTT/DMEM_| 3-(4,5-Dimethyl-2- thiazolyl)-2,5- diphenyltetrazolium Bromide/Dulbecco's Modified Eagle's Medium LC/MS Liquid chromatography/Mass spectrometry Xi LPO Lipid peroxidation Quá trình peroxy hóa lipid.
LSU, ITS, Large subunit, Internal) Các vùng hạt nhân ribosome. RPBI transcribed spacer, DNA-directed RNA polymerase II subunit.
Nội dung được bảo vệ bản quyền — Tải xuống đầy đủ
Từ khóa và chủ đề nghiên cứu
Câu hỏi thường gặp
Luận án "Hoạt tính kháng viêm và chống oxy hóa của Cordyceps spp tại Việt Nam" nghiên cứu về vấn đề gì?
Luận án tiến sĩ nghiên cứu hoạt tính kháng viêm và chống oxy hóa của cao chiết nấm Cordyceps spp tại Việt Nam. Đánh giá hiệu quả sinh học trên bốn chủng nấm.
Luận án "Hoạt tính kháng viêm và chống oxy hóa của Cordyceps spp tại Việt Nam" được bảo vệ tại trường nào?
Luận án này được bảo vệ tại Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia TP. HCM. Năm bảo vệ: 2023.
Luận án "Hoạt tính kháng viêm và chống oxy hóa của Cordyceps spp tại Việt Nam" thuộc chuyên ngành gì?
Luận án "Hoạt tính kháng viêm và chống oxy hóa của Cordyceps spp tại Việt Nam" thuộc chuyên ngành Hóa Sinh Học. Danh mục: Công Nghệ Sinh Học.
Luận án "Hoạt tính kháng viêm và chống oxy hóa của Cordyceps spp tại Việt Nam" có bao nhiêu trang?
Luận án "Hoạt tính kháng viêm và chống oxy hóa của Cordyceps spp tại Việt Nam" có 174 trang. Bạn có thể xem trước một phần tài liệu ngay trên trang web trước khi tải về.
Cách tải luận án "Hoạt tính kháng viêm và chống oxy hóa của Cordyceps spp tại Việt Nam" về máy như thế nào?
Để tải luận án về máy, bạn nhấn nút "Tải xuống ngay" trên trang này, sau đó hoàn tất thanh toán phí lưu trữ. File sẽ được tải xuống ngay sau khi thanh toán thành công. Hỗ trợ qua Zalo: 0559 297 239.